- ￥429.90 - 4737.90
- 阿拉丁
- 上海
- T750877
- 2026年04月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存
- 英文名：
T7 DNA Ligase
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
T750877-600KU/T750877-3000KU/T750877-150KU
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英文名：T7 DNA Ligase
纯度或规格：不含除T7 DNA Ligase之外的其它种类的DNA连接酶，不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷酸酯酶。
SPU：T750877
CAS：-
存储温度：-20°C储存
运输条件：超低温运输
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文献和实验方法【实验原理】DNA 连接酶可以在两个双链 DNA 分子相邻的 5'-磷酸与 3'-羟基之间形成磷酸二酯键，从而可以实现重组 DNA 分子的构建。一般在连接反应之前，DNA 分子都要进行限制性内切酶消化，使待重组的 DNA 分子具有相匹配的末端，黏性末端连接和平齐末端连接是最常用的，但不匹配的末端也可以经过修饰实现连接。下面以质粒 DNA 为载体，介绍目的 DNA 片段与载体的连接。黏性末端的连接涉及三种情况：①载体和 DNA 片段经双酶切后，两端具有不同的粘端，可以直接进行连接反应。②载体和 DNA
把PCR片断连接到T载体上，而Topo TA Cloning用的是DNA Topoisomerase。Topoisomerase的用途一般使用在复制DNA前把超螺旋DNA切割使之解旋后，再连接成线性DNA。Topo TA克隆即使用Topoisomerase高效连接的特性把含3`A端的PCR扩增片断快速连接到3`T端载体上，整个反应只需五分钟！一般T4连接酶需过夜才能高效连接。Topo TA克隆系统提供Topoisomerase I载体，感受态细胞，SOC培养基等。1. Add 1ml of TOPO®
性内切酶或两种限制性内切酶（为同尾酶，如BamHI和BglII）分别处理载体 和外源DNA，得到的粘性末端为互补性突出末端，在连接反应中外源片段和质粒载体DNA均可能发生自身环化或几个分子串连形成寡聚物，且正反两种连接方向都可能有。为了降低载体的自身环化，使正确的连接产物数量达到最高水平，一般载体DNA和外源DNA的分子数比（浓度比）为1：3～1：10之间。同时，为了最大限度地抑制质粒DNA的自身环化，还可将载体DNA的5’磷酸基团用碱性磷酸酯酶去掉，防止其自身环化。而带5’端磷酸的外源DNA
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