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- 阿拉丁
- 上海
- P128631
- 2026年01月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8°C储存
- 英文名：
Phosphatase, Alkaline from Escherichia coli
- 库存：
现货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
P128631-10mg
英文名：Phosphatase, Alkaline from Escherichia coli
纯度或规格：EnzymoPure™, ≥10 units/mg protein(25℃,pH 8.0)
SPU：P128631
CAS：9001-78-9
存储温度：2-8°C储存
运输条件：低温运输
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文献和实验一、实验目的 1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理； 2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。 二、实验原理 有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀，其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80，82％的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低意味着溶质分子间异性电荷库仑引力增加，从而使溶质的溶解度降低
高。如果有相同的抗原决定簇时，则会有交叉反应。方法成熟，使用广泛的还是经典的组织化学方法。下面以碱性磷酸酶的显示方法来学习经典酶组织化学的理论及操作。经典酶组织化学不是显示酶本身，常采用的方法是：在一定条件下，使细胞中的酶作用于酶的底物，使其产物在原地进行捕捉、沉淀转化为有色产物。碱性磷酸酶（AKP）的显示方法最早由Gomeri（1939）提出，现在这种方法称为Gomeri法。碱性磷酸酶是指磷酸单酯酶Ⅰ，它能在pH8.6~10.0的最适条件下分解磷酸单酯，对于与磷酸相接的醇基没有特异性，Gomeri法
磷酸钠，α-萘酚磷酸钠)分解，产生的磷酸离子被孵育液中的钙离子捕获生成磷酸钙沉淀。因磷酸钙不能显色，需加入硝酸钴，用钴离子置换钙离子，形成磷酸钴沉淀后用硫化铵处理，形成棕黑色硫化钴颗粒沉淀，从而显示酶活性部位，硫化钻沉淀的多少与碱性磷酸酶含量成正比，其反应通式 碱性磷酸酶钙-钴法反应原理1)孵育液配制2％氯化钙 20ml2％巴比妥钠 10ml3％β甘油磷酸钠 10ml5％硫酸镁 5ml蒸馏水 5ml孵育液最终pH 9．4,置于冰箱
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