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细胞凋亡检测
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江苏瀚江生物
Hoechst 33342/33258染色 Hoechst 33342/33258染色Hoechst 33342/33258染色
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文献和实验Hoechst33258(或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 (或Hoechst33342)染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液:称取Hoechst33258(或Hoechst33342)1mg,用20ml蒸馏水溶解,过滤,4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液,pH7.0。 固定液:4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化,用PBS洗5min; 或冰冻切片用冰丙酮固定15min,吹干,用PBS洗5min; 或细胞
双苯咪唑类的Hochest-33342和33258及 JC-1染色
双苯咪唑类的Hochest-33342和33258及 JC-1染色 双苯咪唑类的Hochest-33342和33258 该染料可渗透细胞 膜进入细胞内,与DNA结合,使之染色。凋亡细胞对该染料的摄取增高,染色后呈强蓝色荧光。其实验方法如下。 (1)细胞培养及凋亡的诱导:将细胞接种在10cm的培养皿中(106 细胞),在适当的时机诱导细胞凋亡。 (2)收集细胞:悬浮生长的细胞
细胞是用95%的酒精固定20分钟,PBS洗两遍,hochest33258(100ug/ml)染10分钟,然后PI(100ug/ml)染20分钟,50%甘油封片。至于荧光显微镜的激发波长,我还不是很清楚, midas: 哈哈,反了!应该先染色,后固定!hochest33258对活细胞的损伤稍大一些,最好用hochest33342。终浓度用10ug/ml就可以了!激发波长:hochest用紫外激发;PI用绿光激发! linger:您曾经发过一张帖子写到“hoechsts33258,hoechst33342
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