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Cytiva
长层析柱支架(柱内径 26 mm)
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文献和实验原装Thermo-SCX-固相萃取柱/ 3ml / 60mg 应用实例: (1)对乙酰氨基酚――萃取方法: 样品前处理: 准确称取10mg对乙酰氨基酚移至100mL容量瓶中并用水定容至刻度,得到浓度为100ppm的溶液,取25mL醋氨酚溶液(100ppm)与25mL1%磷酸水溶液在50mL烧杯中混合。 柱活化: 依次2mL甲醇、2mL水淋洗。 样品载样: 每分钟进样1-2mL 冲洗: 2mL 的甲醇/水 (5/95, v/v) 洗脱: 2mL 甲醇
对数作图,则应获得一线性的标准曲线。 注意事项 (1)根据层析柱的容积和所选用的凝胶溶胀后住床容积,计算所需凝胶干粉的重量,以将用作洗脱剂的溶液使其充分溶胀。 (2)层析柱粗细必须均匀,柱管大小可根据试剂需要选择。一般来说,细长的柱分离效果较好。若样品量多,最好选用内径较粗的柱,但此时分离效果稍差。柱管内径太小时,会发生“管壁效应”,即柱管中心部分的组份移动慢,而管壁周围的移动快。柱越长,分离效果越好,但柱过长,实验时间长,样品稀释度大,分离效果反而不好
5 ml 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 ml 两种常用柱型。最终上样体积不要超过柱体积 30%。 分子筛 膜蛋白的纯化流程中,分子筛是理想化的最终步骤。不仅可以去除聚集体以及与目的蛋白大小不同的杂质,还可以进行缓冲液更换。这些因素往往能够决定后续的结构测定是否顺利。 推荐使用高分辨率分子筛大体积预装柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL 和 Superose 6 Increase 10/300 GL。其最大上样量可达
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