
逆转录合成第一链cDNA试剂盒-100rxns
- ¥249
- 信励致和
- AB0126
- 2026年04月03日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
100rxns
1.用途:
RNA逆转录合成第一链cDNA。
使用说明:
2. 产品组分:
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组分/含量 |
AB0209 |
AB0126 |
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2×RT&EnzymeMix |
500 µL |
1000 µL |
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DNase/RNase-freeH2O |
1 mL |
2×1 mL |
2. 储运条件:
-25~-15℃保存12个月,干冰运输,避免反复冻融。
3. 注意事项:
(1)使用前混匀,避免反复冻融。
(2)实验过程中避免 RNase污染。
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
-PCR技术的改进:改进之一是利用锁定引物((lock docking primer)合成第一链cDNA,即在oligo(dT)引物的3'端引入两个简并的核苷酸【5'-Oligo(dT)16_30MN-3', M=A/G/C;N=A/G/C/T】,使引物定位在poly(A)尾的起始点,从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo(dT)与poly(A)尾的任何部位的结合所带来的影响;改进之二是在5‘端加尾时,采用poly(C),而不是poly(A);改进之三是采用RNase H一莫洛尼氏鼠白血.病毒
,可用于确定 cDNA 5'和3'末端的未知序列。通常,这些方法分别被称为 5' RACE和 3' RACE。 在 5'RACE中,任何长度的(甚至包括未到达mRNA 5'末端的)第一链 cDNA 都将具有添加序列(即同聚物尾部结构或接头),随后通过 PCR 进行扩增。为了最大化全长 cDNA 的合成,应选择具有最小 RNA 酶 H 活性、高持续合成能力和高热稳定性的逆转录酶。 在 3'RACE 中,全长 cDNA 并不重要,因为不会扩增 PCR 起始位点的上游序列。但是,最好选用可生成长 cDNA
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