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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海希言科学仪器有限公司
- 规格:
1支/盒
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文献和实验粉末状后再按每管100 mg的量分装到1.5 ml离心管中,每管再加入600 µl含β-巯基乙醇的植物总RNA提取液)。 加入600 µl Buffer EX,用力混合均匀,13000 rpm离心10分钟。 小心吸取350 µl上清,转入一个洁净的1.5 ml离心管中。 在上清液中加入等体积的RNA沉淀液,盖上管盖混合均匀,13000 rpm离心5分钟。 弃上清,低速离心数秒使管壁上的上清液聚集到管底,用200 µl吸头吸尽残留的上清液。 加入1 ml 70%乙醇,盖上管盖,旋涡震荡悬浮
处理 1、将新鲜 CRC 组织样本放入预冷的 PBS 中,剔除脂肪组织和坏死的肿瘤组织(通常为黄色或白色),只选取活的肿瘤组织(通常为粉红色)。 2、将 CRC 组织转移到含有 5 mL 预冷的 PBS 溶液中清洗,去除血液和碎片。为防止污染,需要多次重复此步骤至液体变澄清。 3、吸出 PBS,将组织切割为 1-2 mm3 的小块,此步骤可以留存适量组织用于测序、免疫组化分析等。 4、将剩余组织块切碎,并加入 1 ml 预冷的类器官培养基,用 p1000 吸头将肿瘤碎片悬浮液转移到含有 5 ml 解离培养
板置于显微镜下。在不破坏单层细胞的情况下,用移液器吸头轻轻移出自由漂浮的球体,并将其转移到 1.5ml 的离心管中。让球状体在离心管底部沉降 5-10 min,必要情况下可以用微量离心机低速离心 10s。 9、将吸出的球体接种于 200μl 含蛋白浓度 8.0mg/ml 的 Matrigel 胶中,轻轻吹打混匀,迅速操作并防止气泡产生。 10、在 24 孔板的每个培养孔中心接种 25μl 混合液,放入 37℃ 培养箱中静置 10min。待 Matrigel 凝固后,加入 0.5ml hLOs
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