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- 2025年09月23日
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文献和实验成单层的L929细胞用0.25％胰酶消化2～3min。除去消化液后,用10% FCS的RPMI-1640将L929细胞配成1×105/ml,加入96孔细胞培养板中,每孔100μl。2、取100μl不同稀释度的IL-1标准品和待测品,分别加入各孔中,每孔设3个复孔,置37℃,5% CO2温箱孵育56h。3、用PBS溶解MTT为5mg/ml,用0.22μm膜滤器除菌及杂质。4、上述培养体系取出后,每孔加入10μl MTT(5mg/ml),37℃继续培养4h。5、从每孔吸出100μl上清弃去,加酸化异丙醇或加
3）对鲢、鳙鱼苗24h的半致死浓度分别为0.91和0.46rng/L（雷衍之等，1983）。对不同发育阶段的草鱼鱼种96h半致死浓度测定表明，随着鱼体增大，分子氨的半致死浓度增大，其中全长1.73cm的草鱼其分子氨（N）的半致死浓度为0.469mg/L，2.62cm的草鱼为1.325mg/L，7.07cm的草鱼达1.386mg/L（周永欣等，1986）。据报道（Robinetle，1976），水中分子氨在0.12mg/L，对斑点叉尾鲴的生长有明显影响；冷水性鱼类对分子氨很敏感，欧洲内陆渔业咨询委员
以培养的细胞来检测。有两种方法：克隆形成率、贴瓶率测定法和连续传代培养法。 （1）克隆形成率测定:一般以悬浮生长的细胞为培养对象，按有限稀释法做克隆化培养，将不同批号的血清配制成不同浓度的培养基，细胞也稀释成不同浓度，接种到96孔板，每孔200ul，培养一定时间，统计有克隆生长的孔，计算出百分比，再与对照的标准血清相比较，就可看出不同批号血清间的区别。比较低的浓度，更能观察出血清质量间的细微差别。 （2）贴瓶率测定:是以贴壁细胞为培养对象，将细胞稀释至低密度，接种至平皿，每皿200或100
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