- ￥718
- 沃比森WISSEN
- 中国
- VS16281-250g
- 2026年01月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 保质期：
24个月
- 英文名：
Beijing Wissen Technology Co., Ltd
- 库存：
50
- 供应商：
北京沃比森科技有限公司
- CAS号：
NULL
- 规格：
VS16281-250g
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文献和实验CRISPR/Cas 是进行基因编辑的强大工具，可以对基因进行定点的精确编辑。在向导 RNA（guide RNA， gRNA）和 Cas9 蛋白的参与下，待编辑的细胞基因组 DNA 将被看作病毒或外源 DNA，被精确剪切。一、寻找目的基因的靶标使用在线设计网站 CRISPR direct，如需直接复制网址，可在生物学霸后台对话框回复 direct即可。靶点挑选要点：基因敲除靶点应设计在起始密码子附近（包括起始密码子）或者起始密码子下游的外显子范围内。不同 Cas9/gRNA 靶点在基因敲除效率
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70
，从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null) 融合，并表达适当的 sgRNA，可靶定任何 dsDNA 序列，而 sgRNA 的末端可连接到目标 DNA，不影响 Cas9 的结合。因此，Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA。这一套系统为生物体的研究和改造带来巨大潜力。有什么用？通过 Cas9 蛋白形成 DNA 双链的断裂，然后细胞通过 NHEJ 的修复会造成 INDEL 效应 (insertion and deletion
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