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文献和实验快速、准确、半定量。可检测AFP、CEA、CA19-9、CA72-4、CA125、CA15-3、NSE、Cyfra21-1、PSA、f- PSA等。 组织学水平:免疫组化和原位分子杂交组化技术是近年发展起来的一门新兴边缘学科。它将免疫学技术和分子生物学技术同组织病理学制片方法巧妙结合在一起,在组织细胞原位显示某些化学成分和特定基因片段。 常规标本中约5%~15%疑难病例或恶性肿瘤需采用免疫组化进行鉴别诊断和预后分析。 Porter D利用mRNA原位杂交检测细胞水平基因表达,在组织芯片
内参照 DNA,要与经过不同 ChIP 抗体免疫沉淀后捕获的对应 DNA 样本一起完成解交联和 DNA 纯化后,通过测定(如定量 PCR)进行比较,计算 ChIP 沉淀的效率。阴性对照管:一般可以取 ChIP 缓冲液稀释后的目的蛋白管相同含量的染色质作为阴性对照管样本,然后加入正常同型 IgG 抗体(例如,目的蛋白管所用的 ChIP 抗体如果为兔抗,此时就需要用正常兔 IgG,加入正常兔 IgG 抗体量与目的蛋白的 ChIP 级抗体量相同)。阳性对照管:一般可以取 ChIP 缓冲液稀释后的目的蛋白管相同含量
免疫组化常见问题的处理免疫组化常见问题的处理当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM
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