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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
是老化、与老化相关的慢性疾病发生的重要影响因素。 检 测 原 理 葡萄糖来源的 AGEs ( Glc-AGEs ) ELISA 试剂盒利用的是基于 “ 三明治 ” 原理的固相酶联免疫吸附试验( ELISA )。 96 孔板的表面有一层单克隆抗体涂层可直接识别样品中 Glc-AGEs 的特异性抗原位点, 然后使用 HRP 标记的 anti-AGE 抗体结合 Glc-AGEs 形成 “ 三明治 ” 复合物,最后酶显色对样品进行定性和定
目的:1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量测体液中抗原或抗体成份。背景知识:ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzye-LinkeIunsrnentAssy)的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。原理:ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试技术
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