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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。 EC1.4.3.4。作用于一级胺及其甲基化的二、三级胺,也作用于长链的二胺。对所谓生物胺,即酪胺、儿茶酚胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素等也有作用。可使儿茶胺类神经递质失活的酶,可用作抗抑郁征药物。 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相
、 引物 (primers)PCR扩增产物的大小以及扩增靶序列在基因组中的位置是由引物限定的,因此,引物的选择与序列关系到PCR的特异性。(一) 引物的质量一旦确定引物的序列,就可以用核苷酸合成仪合成引物。由于合成的引物中可能含有相当数量的“错误序列”,其中包括不完整序列和脱嘌呤产物以及可以检测到的碱基修饰的完整链和高分子量产物。这些序列可以导致非特异扩增和信号强度的降低。因此,PCR反应所用的引物必须是高质量的引物,且需要纯化。通常可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法、离子交换法、高效液相层析法或寡
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