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Trichomonas stableri斯氏毛滴虫探针法荧光

定量PCR试剂盒
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  • ¥1680 - 2790
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  • DM-GZ1521630
  • 上海
  • 2025年07月12日
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      上海笃玛生物科技有限公司

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    • 应用

      科研实验

    • 检测方法

      ELISA

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1680.0
    规格:96T产品价格:¥2790.0

    Trichomonas stableri斯氏毛滴虫探针法荧光定量PCR试剂盒

    ELISA试剂盒技术流程 

    双抗体夹心法(检测未知抗原)

    间接法(检测未知抗体)

    1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
    2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
    3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
    4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
    5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
    6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

    1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
    2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
    3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
    4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
    5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
    6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

     ELISA试剂盒需自备的设备及试剂    

    1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)

    2. 单道或多道微量加液器及吸头

    3. 稀释样品的EP管

    4. 蒸馏水或去离子水

    5. 吸水纸

    6. 盛放洗液的容器

    产品细节图片1

    性能:
    1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900
    2.灵敏度:检测浓度小于10 pg/ml
    3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
    4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%

    ELISA试剂盒优点:
    1、高效、灵敏、特异的抗体;
    2、重复性和可靠性高;
    3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
    4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
    5、可检测指标齐全:细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等;
    6、价格优惠,质量保证,限度的节省实验经费。

     

    实验步骤

    1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

    2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液

    3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

     

    注意事项剂盒的储存及有效期

    1. 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。

    2. 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。

     

    须知:

    试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。

     ELISA试剂盒报

    1、ELISA标准曲线;

    2、详细的实验步骤;

    3、完整的实验报告(试剂耗材,实验方法,实验结果及结果说明);

     

    [样本处理及要求]

    1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

    4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

    注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

     

    [需要而未提供的试剂和器材]

    1.酶标仪(450nm)

    2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3.37℃恒温箱

    4.蒸馏水或去离子水

    产品细节图片2

    ELISA检测试剂盒承诺

    公司长期与各大高校、医院及权威科研单位保持着良好的合作关系,公司的产品质量及服务态度得到了他们的一致认可。笃玛生物本着客户至上的原则为客户提供优质产品,公司承诺产品有任何质量的问题免费包退换(非人为因素造成的)。公司提供免费代测服务,并且承诺收到样本七个工作日出结果,确保数据的准确性

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