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5×105cells/T25瓶
小鼠胃黏膜上皮细胞
细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。可接受定制服务。
购买细胞注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的完全培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
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文献和实验*发表【中文论文】请标注:由上海酶研生物科技有限公司提供; *发表【英文论文】请标注:From Shanghai EK-Bioscience Biotechnology Co., Ltd.
实验材料:1. 动物胎体胃黏膜,胃溃疡或胃癌手术切除的正常胃黏膜组织2. 1%Ⅳ胶原蛋白或1%明胶铺培养瓶,4℃冰箱内过夜,使用前在37℃培养箱内放置2h,然后用培养液浸洗1次。3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.44. 250000U/LⅠ型胶原酶或125000U/LⅠ型胶原酶和0.5%透明质酸酶,DMEM配置5. 解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 离心管(15ml、50
胎鼠,放入70%乙醇中消毒1min。经腹正中切口取出小肠,放入预冷的PBS中。 2. 用PBS冲洗后,剪除肠系膜。纵行剪开肠壁,用PBS冲洗3次,洗去粘液。 3. 将肠壁剪成1mm3 左右的小块的组织块,放入20ml消化液中,37℃水浴中振荡消化30min。 4. 用吸管反复吹打组织块3-5min,然后以1000r/min,离心5min。吸去消化液后,加入PBS,反复吹打,悬浮沉淀的肠绒毛组织。在相差显微镜下观察可见单个黏膜上皮细胞或隐窝细胞团。 5. 将消化下来的细胞
2-3次,将黏膜剪成约1mm3 大小的组织块。 2. 将植块放入培养皿中,上皮面朝下;也可在培养皿内放入盖玻片,将组织块放在盖玻片上培养。 3. 当组织块贴壁后,加入适量培养液,培养液的量为能湿润组织块但不使组织块浮起为宜,在37℃、5%CO2 培养箱内静置培养。 4. 组织块贴壁1-3d后,补充培养液。以后每隔2-3d换液1次。 5. 植块培养3d后,细胞从植块边缘迁出。1周后,细胞向外迁移扩展,并逐渐分化,细胞的形态逐渐趋向正常食管黏膜上皮细胞
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