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文献和实验缓慢滴加 650μl 预热的类器官培养基,确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃,5%CO2 的培养箱中培养,每 2-3 天更换培养基(用于换液的类器官培养基内不含 Y27632)。 类器官传代 14、吸出类器官培养液,机械分离 Matrigel,然后加入 500μl 胰蛋白酶,放置于 37℃ 培养箱中孵育 1-2min 后,用移液器多次吹打,从基质胶中释放类器官。 15、用含有 10%FBS 的 DMEM/F12 培养基终止消化,在 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 16、用冷 PBS
10kDa 干扰素γ诱导蛋白(IP10)在牛生物样本中的精确检测实验
预期应用本试剂盒运用双抗体夹心 ELISA 法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中 IP10 含量。需自备的设备及试剂1.450±10nm 滤光片的酶标仪 (建议仪器使用前提前预热)2.单道或多道微量加液器及吸头3.稀释样品的 EP 管4.蒸馏水或去离子水5.吸水纸6.盛放洗液的容器标本的采集与保存1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC 或-80
实验请使用新的标准品溶液。3. 检测溶液 A 及检测溶液 B:Detection A 及 Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释 (如:10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制 (100μL / 孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2 mL。4. 浓洗涤液:用 580 mL 蒸馏水或去离子水将 20 mL 浓洗涤液稀释至 600
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