Human GM-CSF ELISA KIT 人的粒细胞－巨

Human GM-CSF ELISA KIT 人的粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子

ELISA Kit是一种常用的生物检测工具，用于检测样本中特定的蛋白质、抗体、抗原或小分子化合物。它以酶促反应为基础，结合抗原抗体的特异性结合原理，广泛应用于科研、临床诊断和药物研发等领域。

 

ELISA试剂盒的基本原理

通过将抗原或抗体固定在固相载体上（如微孔板），然后加入酶标记的抗体或抗原，利用酶催化显色反应来检测目标分子的含量。

 

ELISA试剂盒的组成

预包被酶标板：含有固定化抗体或抗原。

标准品：已知浓度的目标分子，用于绘制标准曲线。

酶标二抗：结合目标分子的抗体，常标记有辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）。

显色底物：常用TMB（四甲基lianben胺）作为底物，在HRP的作用下显色。

停止液：如硫酸，用于终止酶促反应并固定颜色变化。

洗涤液：清洗酶标板上的非特异性结合物。

样品稀释液：稀释样品以适应检测范围。

 

ELISA试剂盒使用流程

样本准备：将血清、血浆或培养上清等样本稀释至适当浓度。

添加样品：将样品和标准品加入包被的酶标板。

孵育与洗涤：在适当温度下孵育，使抗原抗体充分结合。

多次洗涤去除非特异性结合物。

酶标抗体加入：添加酶标抗体，与目标分子结合后再次孵育和洗涤。

显色反应：加入显色底物，酶催化底物显色，颜色强度与目标分子浓度相关。

 

结果测定：

使用酶标仪在特定波长下读取吸光值，并通过标准曲线计算样品浓度。

 

注意事项

样品处理：避免样品污染，必要时进行离心或过滤。

洗涤彻底：洗涤不彻底会导致非特异性吸附，影响检测结果。

孵育条件：严格按照试剂盒说明书的时间和温度操作。

标准曲线绘制：每次实验需使用新鲜的标准品绘制标准曲线。

 

批间差异：

不同批次试剂盒可能存在差异，需注意实验一致性。

 

ELISA试剂盒的优势

高灵敏度和特异性。

能同时处理大量样本。

操作简单，成本较低。