核因子κB(NFkB)等多因子检测试剂盒(流式荧光发光法)

【求助】IKK-NF-κB通路抑制剂NBD

xueruo 你好，本人要做IKK-NF-κB通路方面的研究，做的是胃上皮细胞，指导导师让我用NBD抑制IKK活性，并要求我订购IKKβ磷酸化抗体做IKK活性试验，我有点困惑，查了不少的文献，IKK都是引起IκB磷酸化激活NF-κB的，而非IKK磷酸化激活的，其中的原理是什么?NBD多肽我在文献上看到有野生型，突变型，好多文献里NBD多肽是找公司合成的，肽链有长有短，打电话问公司订，他们要求我提供序列，我也不知道提供什么？恳请各位大侠给出高见，谢谢

非放射EMSA实验技术讨论

这样一个问题： 某公司的激活-和转运检测试剂盒，监测是否激活NF-KB测试剂盒原理：NF-κB未被激活时和IκB-α形成一个复合物，分布在细胞浆中。在炎症因子、生长因子或趋化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情况下，IκB-α会在Ser32和Ser36被磷酸化，随后被泛素-蛋白酶体途径降解。NF-κB和IκB-α解聚后，其核定位序列被暴露，从而被转运到细胞核内促进NF-κB依赖的基因转录。通过免疫染色检测NF-κB的主要亚基p65是否被转移到细胞核内，就可以判断NF-κB是否被激活.本NF-κB

【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗

1 为什么要用细胞总蛋白做p65,而不用胞核蛋白呢?这样胞浆的IKBα的水平和胞核NF-κB的水平是不是也可以的? 2 有些因子是通过促进P65核转位（自IkB解离，而IkB量并不变）,就是说IKB自解离,那实际上在NF-κB入核的过程中,胞浆的IKB用western做是不是也应该增加啊? 还是说在IKB没解离前,一抗就能和IKBα结合? 1 测NFkB活性变化，对于非磷酸化抗体，必须做核蛋白的western或EMSA，这是反映NFkB有无功能改变；如果核蛋白有变