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文献和实验细胞或迟发性变态反应的效应因子。80-82 细胞膜表面糖蛋白很有用,因为它使识别和计数具有不同功能的淋巴细胞亚群成为可能。但目前有关T淋巴细胞表面糖蛋白的描述,通常都定义了实行不止一种功能的亚群。带有某一特定糖蛋白标志物的细胞数增加或减少,并不意味那些细胞在体内只实行某一特定功能。由于这个原因,淋巴细胞亚群的计数结果与疾病诊断或对治疗的反应有经验上的联系。而且,这些经验上的关联,在临床上很有用,正如表31-5的例子所证明的那样。 计数血液中淋巴细胞亚群的方法是以多克隆抗体的提供为基础的,这些多克隆抗体
了)。I. 我所测定的蛋白分子量是105KD,按理说分离胶应当采用7.5%,但我所查资料却要求分离胶和浓缩胶均采用11%的配方,不知为何?解答:上述您提到的两种凝胶均可以使用,因为105KD的蛋白在上述两种胶的线性分辨范围内,但需注意条带位置。J. 接下来我准备采用DAB显色技术,二抗是生物素化的多克隆抗体,三抗是亲和素生物素体系,不知采用这样的方案后,封闭液是否要作调整,能否再用5%的脱脂奶粉呢?好像有资料说脱脂奶粉会影响亲和素生物素的生成,是吗?解答:不能使用脱脂奶粉,因为脱脂奶粉中含生物素,用BSA代替应该
技术,二抗是生物素化的多克隆抗体,三抗是亲和素生物素体系,不知采用这样的方案后,封闭液是否要作调整,能否再用5%的脱脂奶粉呢?好像有资料说脱脂奶粉会影响亲和素生物素的生成,是吗?解答:不能使用脱脂奶粉,因为脱脂奶粉中含生物素,用BSA代替应该好一点.M. 还有一问题,一般一次上样的蛋白总量是多少,跟目的蛋白的表达量有关系吗?解 答:Western Blot一般上样30-100微克不等,结果跟目的蛋白的丰度、上样量、一二抗的量和抚育时间都有关系,也与显色时间长短有关。开始摸条件时,为了拿到阳 性
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