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文献和实验免疫亲和层析技术使用单克隆抗体或经过亲和层析纯化的多克隆抗体。在某些情况下,可用未纯化的多克隆抗体,但一般不使用混合的单克隆抗体。 1. 应用多克隆抗体进行免疫亲和层析 使用多克隆抗体进行免疫亲和层析有一定的局限性,因为多克隆抗体通常结合抗原分子上的多个表位,虽然亲合力高,但洗脱困难。当一种抗原与多种不同的抗体结合后,需要很苛刻的洗脱条件,通常会损坏抗体层析柱,至少也会使部分抗原变性。在这种情况下,每种抗原和抗体相互作用的洗脱条件不同,故难以建立有效的洗脱条件。应用多克隆抗体
性比对。如果比对结果,证明同源性比较高的,也可以选择。 (3)分析样本中的蛋白质的结构性质 了解样本蛋白的结构性质有助于选择最合适的抗体,至少两方面因素需要考虑: 待测样本蛋白的结构域:抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体(如:细菌)或细胞,抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。如果打算用FCM
其活性,防止其与宿主效应细胞相互作用,干扰内毒素介导的信号传导通路等。治疗制剂包括内毒素类似物、抗体、亚单位疫苗、多粘菌素结合柱、重组人蛋白、内毒素合成和细胞内信号传导的小分子抑制剂。 (1) 抑制类脂A生物合成 噬菌体产生一小段核苷酸序列,起着反义RNA作用,阻断合成LPS的细菌合成酶[10]。按此原理设计的抗G-细菌的药物,其作用与青霉素相似。抑制脱乙酰化酶制剂之一的L-573655,竞争性地抑制80%~90%的LPS合成,4h内快速杀灭大肠杆菌(E. coli)。另一种同类制剂
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