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文献和实验的抗体分子或片段,但由线状噬菌体表达更为方便有效。M13、fd、F1等噬菌体的外壳蛋白由5种蛋白组成:pⅢ、pⅥ、pⅦ、pⅧ和pⅨ。每种含量不一,其中pⅧ含量最多,每个噬菌体有2700个pⅧ亚基,其余4种蛋白仅5个拷贝。增加噬菌体外壳蛋白的长度并不影响噬菌体的装配,抗体以融合蛋白的形式表达于噬菌体表面。噬菌体表达质粒常用的有fd-CAT1、fd-tet-DOG1、PHEN1、pComb3和pComb3H等。抗体融合蛋白构建多用pⅢ和pⅧ,pⅧ拷贝数高,低亲和力的抗体蛋白容易筛选出来。 在噬菌
的填料,颗粒细点,起始盐浓度高点,这样保证能浓缩好你的样品. 35) 楼主:这段在用离子交换柱过抗体,请问抗体的吸收图谱是怎样的?它的特征吸收峰在哪里,不同的多克隆抗体是不是还有自己的特征吸收峰, 抱歉,你是说色谱图还是紫外吸收图呢,蛋白一般都是在280检测的呀,不同的的蛋白虽然有一点差别,但是那也不是很明显的,其实就用280就可以了. 36) 我的蛋白以GST融合蛋白的形式表达在E Coli中,分子量14~15kDa,蛋白的疏水性很强,等电点在7左右。菌破碎后,用表面活性剂提取的融合
只要把青霉素G偶联到琼脂糖凝胶上就可以特异用于这个酶的纯化。苯基琼脂糖凝胶浓缩可以,但是除盐不好,你想浓缩效果好,你可以把硫酸铵的浓度提高到2.5M再挂在柱子上,直接用ph7.5,0.05mol/L的磷酸缓冲液洗就应该可以。你想浓缩的效果好,那尽量用短粗柱子,也就是径高比大的柱子。这样扩散少些。此外要用高载量的填料,颗粒细点,起始盐浓度高点,这样保证能浓缩好你的样品。 35)楼主:这段在用离子交换柱过抗体,请问抗体的吸收图谱是怎样的?它的特征吸收峰在哪里,不同的多克隆抗体是不是还有自己的特征吸收
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