内皮糖蛋白(ENG)多克隆抗体(生物素标记)

生物素亲和素 ELISA 系统介绍

亲和素和从卵白中提取的亲和素一样，也由4条相同的肽链组成。因链霉亲和素在检测应用中发生的非特异性结合远较亲和素低，因此日渐受重视，已有取代亲和素之势。 各种抗体或酶的标记物在国内已有商品供应，使用方便。BAS ELISA 具有的特点： ①对于所有的抗原抗体系统，包括免疫细胞化学、ELISA、免疫印迹法等都适用，应用范围极广； ②BAS 在温和条件下可与各类生物大分子如蛋白质、脂多糖等结合，并且这种结合对原生物大分子的生物活性无影响； ③每个亲和素分子可与 4 个生物素分子结合，所以可以偶合更多连接生物素

抗体的生物素化标记

。 9. 最后，样品加入叠氮钠（终浓度0.5 g/L）及1.0 g/L BSA。将结合产物置4℃，避光保存，亦可加入50%重蒸甘油，置-20℃保存。 要点： 1. 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在，会抑制标记反应。因此，蛋白质在反应前要对0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液或0.5 mol/L 硼酸缓冲液 2. 所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同，选择不当则影响标记的效率，应先用几个不同的分子比来筛选最适条件。

【交流】抗体的生物素化标记

1ml/管，蛋白质在1-3ml之间洗下； ９．最后，样品加入叠氮钠（终浓度0.5g/L）及1.0g/L BSA。将结合产物置4℃，避光保存，亦可加入50%重蒸甘油，置―20℃保存。 要点： １． 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在，会抑制标记反应。因此，蛋白质在反应前要对0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5 mol/L硼酸缓冲液充分透析； ２． 所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同，选择不当则影响标记的效率，应先用几个