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文献和实验。为了达到比较快而且比较彻底的反应,抗原浓度应尽量提高(也就是高中课本上讲的勒沙特列原理),但过高的浓度有可能造成聚集形成沉淀。一般推荐浓度是5-10 mg/ml。需要注意的是beads的承载量并没有这么大。用来连接的蛋白在buffer体系中必须完全溶解,如果不能溶解可以尝试加入去垢剂,多肽等小分子化合物可以用DMSO、DMF、二氧六环助溶。 (3)反应温度与时间。此反应可以在室温进行,一般来说,室温4小时反应足够完成,如果担心抗原降解,可以在4 ℃进行,需要过夜反应。
一、多克隆抗体的概念抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样
制备多克隆抗体抗原的准备和免疫原的注射剂量 抗原的种类繁多,包括天然的蛋白质抗原和细胞性抗原、合成肽抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫动物动物具有不同的特殊性。一般的完全抗原免疫动物需加用佐剂,合成肽抗原和基因工程抗原等半抗原物质需先通过人工的方法与蛋白质载体连接后再与佐剂混合免疫动物,方可获得理想的免疫效果。 免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于细胞免疫的剂量,每次用于免疫羊的细胞
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