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文献和实验药物代谢 药物代谢,又称药物的生物转化(biotransformation),是指药物经过体内吸收、分布之后,在药酶的作用下经历化学结构变化的过程,是药物从体内消除的主要方式之一。药物在体内的生物转化,分为Ⅰ相代谢反应和Ⅱ相代谢反应。 肝脏是药物代谢的重要器官,是机体进行生物转化的主要场所,含有参与药物代谢Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢的各种酶。UGT家族是人体内仅次于CYP450家族的第2大药物代谢酶。UGT介导的葡萄糖醛酸结合代谢不仅会显著影响药物的口服生物利用度和药物的体内药动学过程
摘要 基因重组蛋白在大肠杆菌中表达时,由于表达量高,往往形成无生物活性的包涵体。包涵体必须经过变性和复性的过程才能获得有活性的重组蛋白。如何提高基因重组蛋白质的复性率,是生物工程技术的一个研究热点。对近年来的重组蛋白质的复性方法做一评述,为研究蛋白质折叠以及复性技术的进一步应用提供依据。 关键词 重组蛋白 包涵体 复性 二硫键 到目前为止,人们表达的重组蛋白质已有4000多种,其中用E.coli表达的蛋白质要占90%以上,尽管基因重组技术为大规模生产目标蛋白质提供
鉴定。转化大肠杆菌JM109后得到重组菌tdh/Trc99A/JM109(命名为NWⅡ)。取10ml NWⅡ过夜饱和生长菌加入1000ml LB-Amp+,37℃培养至菌液A600=0.6时,迅速将培养温度降至30℃,并加入IPTG至终浓度为0.8mmol/L,继续培养6h。5000r/min低温离心10min,分别收集上清和沉淀,沉淀经超声波破碎,12000r/min低温离心10min,收上清。按35g硫酸铵/100ml上清进行沉淀,4℃透析过夜后做SDS-PAGE分析。取诱导前、后的NWⅡ
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