乳腺癌扩增序列3(BCAS3)重组蛋白

教您正确选择逆转录酶，适用 6 种不同应用

。因此，文库提供了关于特定细胞类型、器官或发育阶段的基因时空表达信息。cDNA 文库克隆可用于鉴定新型 RNA 转录物、测定基因序列和重组蛋白的表达。 构建 cDNA 文库的必要条件是 RNA 可适当代表其全长和/或相对丰度，因此，逆转录酶的选择非常重要。具有高持续合成能力的逆转录酶可以合成长 cDNA，并捕获低丰度 RNA。同样，在对具有高度二级结构的 RNA 进行逆转录时，建议使用热稳定性较强的逆转录酶。 cDNA 末端快速扩增（RACE） cDNA 末端快速扩增（RACE）是一种基于 PCR 的方法

QIAgenes 预制蛋白表达载体

对35,000个人类基因所设计），专门用于解决E.coli中重组蛋白表达的瓶颈问题。 文章一开始就提到，在E.coli中表达真核蛋白的成功率很低，限制因素之一就是细菌和哺乳细胞的密码子使用频率不同；限制因素之二mRNA的二级结构导致翻译的低效率和蛋白的低产量；限制因素之三是信号肽的存在。而使用QIAgene E.coli预制表达载体则综合考虑了密码子使用频率的问题，同时消除了容易引起mRNA的二级结构的重复序列和其他因素。针对限制因素之三的信号肽因素，我们都知道在真核细胞中，糖基化蛋白和分泌

【原创】蛋白质不表达：常见原因及分析

。但是有一点我可以有很大把握的说：对于真核表达，密码子优化只能起锦上添花的作用（确认有表达，以此来提高表达量），而不能雪中送炭（没有表达出来，通过密码子优化极有可能不奏效）。 4、质粒不稳定或者质粒丢失。pET系统通常比较稳定。但是你选用带氨苄青霉素抗性的载体时，也许有可能产生β-lactamase降解了抗生素，使质粒丢失。还有一种情况是表达重组的毒素蛋白，对宿主细胞也有毒性，造成质粒丢失。这种情况多见于真核表达系统。 5、蛋白酶将蛋白降解了。这种情况常由重组蛋白本身的N-或C-端序列引起