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文献和实验重组蛋白A在免疫试剂应用中的新进展广州精达公司-美国免疫学博士 胡勇摘要 抗体是免疫诊断试剂领域最重要的原料,蛋白A是纯化抗体最有效的工具,广泛用于免疫诊断试剂的许多领域。重组蛋白A具有产量大,成本低,纯度高,特异性好的优点。重组蛋白A的国产化将极大促进免疫诊断试剂的产品开发和市场效益。 关键词 抗体纯化 免疫诊断试剂 重组蛋白A 国产化蛋白A(Protein A)为金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白,具有与人类和哺乳动物血液中免疫球蛋白IgG分子的Fc段特异性结合
免疫亲和层析法常用于蛋白质等生物大分子的纯化。但你是否想过,一根亲和层析柱子也能用来进行细胞分选,而且还不使用高亲和力抗体? 在细胞分选中,我们常常利用免疫识别特性来进行,比如流式分选(FACS)和免疫磁分选(MACS)。 免疫细胞的划分是依据表面标志 CD 分子,可以被抗体识别。比如针对 CD4 + T 细胞这一特定类群,表面含有 CD45、CD3 和 CD4 标记。而表达 CD4 就是辅助性 T 细胞的特征。 由此而来,免疫磁分选利用特定抗体偶联磁珠来捕获细胞。细胞与磁珠
不同的表达系统,最常用的有大肠杆菌、哺乳动物细胞、酵母、昆虫细胞或是植物细胞等。但若使用哺乳动物细胞来表达目的蛋白,His-tag 则不适宜,因为系统中的组氨酸会干扰其纯化表现,其他的生产商也不建议这样的使用方式 。而 Strep-tag® 系统则与这些表达系统都能互相搭配,见下图实验数据: 图 2 全方位的蛋白质研究平台:从纯化到固定分析 除了用来生产高纯度的蛋白,Strep-Tactin® XT 与 Twin-Strep-tag® 间的高亲和力更能利用来稳定的固定目标蛋白,以进行蛋白
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