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文献和实验可以直接定量 PCR 扩增产物而无需从反应混合物中纯化 DNA ,并且可以检测到 DNA 中少量的重组蛋白的污染 .Hoechst 33258 染料有明显的 AT 选择性 , 而 PicoGreen 试剂则很少有 AT 或 GC 选择性,因此能够对任何来源的 DNA 进行准确定量。 在这里我们给出了一个 DNA 定量的例子,对光吸收 (260nm) 定量和用 PicoGreen TM 进行荧光定量作了比较。我们在这里向大家展示了一台仪器能够根据提取的 DNA 质量选择性使用这两种分析方法的优势
组学方法的主要工具。正在采取巨大努力来使重组蛋白的表达和纯化自动化。已经在大肠杆菌和杆状病毒系统中发展了生产大量平行重组蛋白的微小表达系统。已经生产了高密度融合蛋白的微阵列来筛选抗体特异性,也已经生产了高密度单链抗体文库分析来确定适当的抗原。 Table 1.Classes of capture molecules Capture molecules Source Technique Refs mAb Mouse Hybridoma Reviewed in [42,43
转移载体上同时克隆两个外源基因,表达产物可加工形成具有活性的异源二聚体或多聚体。 另外,昆虫杆状病毒表达系统具有剪切的功能,能表达基因组DNA;还有对重组蛋白进行定位的功能,如将核蛋白转送到细胞核上,膜蛋白则定位在膜上,分泌蛋白则可分泌到细胞外等。最后,杆状病毒对脊椎动物无感染性,现有研究也表明其启动子在N-%动物细胞中没有活性,因此在表达癌基因或有潜在毒性的蛋白时可能优于其它系统。 3、杆状病毒载体的重组与筛选 杆状病毒由于基因组庞大,外源基因的克隆不能通过酶切连接的方式直接插入,必须
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