NobleRyder NR80187-1 裂解 EDTA

流式课堂 | 外周血抗凝剂，选 EDTA or 肝素？

小板的聚集，从而阻止血液凝固。 2 两种抗凝剂的特点 EDTA 钾盐在血液中的溶解性更好，因而使用较多，尤其是二钾盐——EDTA-K2 可以通过喷雾干燥法附着在采血管的内表面，不会对采集的血液样品产生稀释。 EDTA 对血细胞形态的影响比较小，有较好的稳定性，但 EDTA 会抑制或干扰纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合，不适于血凝和血小板功能的检测，也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。 肝素 肝素螯合力低，对水分子运动的影响小，对血液成分的干扰少，不影响红细胞体积，不引起溶血，可谓优点

细胞裂解

的核酸；如果我们的目的是蛋白，那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液，在提取蛋白后，再根据实验需要复性蛋白等。以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：50 mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系），150 mM NaCl（等渗体系），1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂），1 mM EDTA（变性剂和稳定剂），5 µg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂），5 µg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂），1% Triton x-100（破坏细胞），1% Sodium

碱裂解法提取质粒DNA的研究

的方法进行质粒DNA的提取，所用具体试剂见表1: ①挑取单菌落，接种于4. 0mlLB (含氨苄青霉素)液体培养基中， 37℃、250 rpm振荡培养过夜(约12～14h) 。②取1. 5ml培养物加入Eppendorf管中，室温12000g离心1min，弃上清。③将细菌沉淀重悬于100μl预冷的溶液Ⅰ中，剧烈振荡，使菌体分散混匀。④加200μl新鲜配制的溶液Ⅱ，颠倒数次混匀(不要剧烈振荡) ，并将离心管放置于冰上2min。⑤加入150μl预冷的溶液Ⅲ，将管温和颠倒数次混匀冰上放置3min。⑥加入