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- 2025年07月09日
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探针设计合成-2OD（一端标记、DIG）
服务介绍：
根据提供的基因序列，采用寡核苷酸设计软件，设计出候补探针序列，经数据库比对后，判断特异性合格后，按序列合成出对应的核酸序列并标记特定的标记物.
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名称 |
规格 |
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探针设计合成-2OD（一端标记、DIG） |
条/2OD |
实验流程：
1.1设计
设计具有特异性的探针序列
1.2 合成
采用固相亚磷酰胺三酯法，经过四步循环反应：脱保护、耦连、加帽、氧化，逐一将一个一个核苷酸单体连接在3’固相载体上,在过程中将修饰标记在相应位置。
1.3 氨解
将合成好的寡聚核苷酸从固体载体(CPG)上化学切割下来，经氨解脱去保护基团。
1.4纯化
粗品质检合格后，对粗品进行HPLC纯化，通过分离度不同分离杂质，制备出目标产物纯品。
1.5质检
利用LTQ-MS质谱仪对目标产物纯品进行检测。
1.6 定量分装
利用酶标仪对合格纯品进行A260定量分装，然后用真空干燥机抽干样品至呈干粉状。
送样运输要求：
干粉状态4度运输。液体状态-20度运输
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文献和实验探针设计合成-2OD（一端标记、DIG）
I采用了显色法，使用显色底物 NBT/BCIP；而Starter Kit II选用化学发光法底物CSPD。 如果您用来合成探针的DNA模板的量比较少或是质量不够高的时候，建议您使用PCR DIG Probe Synthesis Kit。该试剂盒专用于制备高灵敏度的杂交探针，例如单拷贝的基因。其另一个特点就是实验中无需定量斑点检测过程，通过定量凝胶电泳就可以快速确定PCR标记探针的效率。
问：本人想合成一端核苷酸，我需要很大的量，但我不知到是不是公司给我合成后，拿回来我自己再扩增，还是公司直接合成我所需要的量？ 答：首先的是要明确你合成这段核苷酸的用途。如果是单链引物，用2OD也即是公司合成的量就足够了。是双链则另当别论。
与探针设计策略。 先对各个亚群设计各自保守的引物与探针，然后探针用同一染料标记，这样在实时PCR反应中，虽然是多重PCR反应，但报告却是同一个染料报告。 8. 基康公司有多种染料探针合成，可满足ABI7700荧光定量PCR仪多重PCR检测标准。 采用荧光标记探针检测产物的特异性比较强，TaqMan探针是荧光定量PCR中常用的荧光探针，一般TaqMan探针5′端的荧光标记基团是FAM、VIC等，TaqMan探针3′端荧光标记集团为TAMRA、Quencher等
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