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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C避光
- 保质期:
12个月
- 英文名:
TUNEL In Situ Apoptosis Kit (HRP-DAB Method)
- 供应商:
武汉益普生物科技有限公司
- 规格:
20Assays/50Assays/100Assays
| 规格: | 20Assays | 产品价格: | ¥1650.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50Assays | 产品价格: | ¥2850.0 |
| 规格: | 100Assays | 产品价格: | ¥4620.0 |
| 中文名称 |
TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒(HRP-DAB显色法)
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| 英文名称 |
TUNEL In Situ Apoptosis Kit (HRP-DAB Method)
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| 检测原理 |
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,剪断核小体间的基因组DNA,暴露的3’-OH可在末端脱氧核酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素标记的dUTP,辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)可与之结合,在HRP的催化下通过DAB显色可观测到凋亡细胞,从而可通过普通光学显微镜检测到细胞的凋亡。由于正常的或正在增殖的细胞中几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被标记。这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
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| 检测方法 |
比色法
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| 样本类型 |
石蜡切片;冰冻切片
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| 检测时间 |
3 hours
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| 检测仪器 |
普通光学显微镜
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| 自备试剂 |
4%多聚 甲醛(E-IR-R113),0.2% Triton X-100(E-IR-R122),3% H2O2(E-IR-R115),二甲苯,乙醇,DNase I,PBS(E-BC-R187),ddH2O,苏木素(E-IR-R120),中性树胶(E-IR-R118)
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| 保存温度 |
该产品可在-20°C避光条件下保存12个月。
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| 有效期 |
12个月
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| 运输条件 |
冰袋
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
素与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号,但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法,利用聚合物与二抗结合,形成聚合物-二抗复合物,实现信号放大,该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中,针对 HRP(辣根过氧化物酶)显色系统,其常用底物为DAB/AEC(HRP/DAB 呈棕褐色染色,具有很好的光稳定性,HRP/AEC 呈红色染色,在阳光下会褪色,不易保存。 基础 IHC
标记(TdT 2m ediatedx2dU TP n ick end labeling, TUN EL ) 技术, 是目前原位检测细胞凋亡最敏感、快速、特异的新方法, 已广泛用于生物、医学研究领域。TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL)是一种用来检测细胞凋亡(apoptosis)的分析方法.细胞凋亡有一项重要的特征为细胞内的DNA会碎裂成片段(DNA fragmentation),TUNEL可以有效的去探测DNA片段的产生,所以可以传达细胞凋亡
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