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- 2026年05月28日
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鬼笔环肽染色
服务介绍：
鬼笔环肽(phalloidin)可特异性与细胞内聚合微丝中的丝状肌动蛋F-actin结合，通过藕联的荧光素分子，从而显示微丝骨架在细胞中的分布。与抗体相比，鬼笔环肽无物种限制，染色特异性极-强，染色区和未染色区对比性非常清晰，而且标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持。也适用于甲醛固定和去垢剂通透处理后的组织或细胞样本。
实验流程：
1.细胞固定并破膜：培养好的细胞爬片倒去培养基，用PBS洗。4%多聚-甲醛固定30min，PBS洗3次，每次5min，滴加0.1%TRITON，破膜20min.
2.加鬼笔环肽：爬片稍甩干后用组化笔在盖玻片中间细胞分布均匀的位置画圈（防止液体流走），加50-100μl鬼笔环肽工作液，室温孵育2h，PBS洗3次，每次5 min。
3.DAPI复染细胞核：爬片用PBS（PH7.4）洗涤3次，每次5min。去除PBS后在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min
送样运输要求：
按细胞准备流程PFA固定细胞15min后用无菌PBS洗涤后用无菌PBS浸泡，离心管封口膜封好，4℃冰袋保存运输到实验室
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文献和实验鬼笔环肽染色
从一种毒性菇类中分离的剧毒生物碱，它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡。
【五分钟讲实验】F-actin 怎么看？一篇讲清鬼笔环肽染色和避坑要点
一、鬼笔环肽是什么？ 鬼笔环肽，也常写作 phalloidin，是来源于毒蘑菇的一类环状多肽。 它在实验室里最常见的身份不是“毒素”，而是 F-actin 染色探针。科研人员把它连接上 FITC、TRITC、Alexa Fluor 等荧光基团后，就可以用来观察细胞内聚合态肌动蛋白微丝。 · 它主要识别F-actin，也就是聚合成丝状结构的肌动蛋白，而不是游离的 G-actin 单体。 · 它与 F-actin 结合后能让微丝结构在荧光显微镜或共聚焦显微镜下变得清楚。 · 它通常用于固定
HE&尼式染色.pdf
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