- ￥14
- 禾午生物
- P56610
- 国产
- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 英文名：
pLV3-U6-MCS-Stuffer-sgRNA-Cas9-EGFP-Puro
- 保质期：
3个月~12个月
- 供应商：
上海禾午生物有限公司
- 保存条件：
负20℃&负80℃
- 规格：
干粉&甘油菌
| 名称 | pLV3-U6-MCS-Stuffer-sgRNA-Cas9-EGFP-Puro |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞,慢病毒 |
| 质粒用途 | 基因编辑 |
| 片段类型 | CRISPR |
| 原核抗性 | Amp |
| 筛选标记 | Puro |
| 荧光标记 | 绿色 |
| 启动子 | U6 |
| 复制子 | pUC |
| 感受态 | Stbl3 |
| 温度 | 37度 |
| 正向引物 | U6-F |
| pLV3-U6-KBTBD11(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP-Puro |
| pLV3-U6-KBTBD11(human)-sgRNA1-Cas9-EGFP-Puro |
| pLV3-U6-Gadd45b(mouse)-sgRNA1-Cas9-EGFP-Puro |
| pLV3-U6-MCS-Stuffer-sgRNA-Cas9-EGFP-Puro |
| pLV3-U6-MCS-BsmBI-EcoRI-sgRNA-Cas9-EGFP-Puro |
| pLV3-U6-Adar(mouse)-sgRNA2-Cas9-Fluc-Puro |
| pLV3-U6-SRC(human)-sgRNA3-Cas9-EGFP |
| pLV3-U6-OTUD1(human)-sgRNA1-Cas9-Puro |
| pLV3-U6-SRC(human)-sgRNA1-Cas9-EGFP |
| pLV3-U6-Mgll(mouse)-sgRNA2-Cas9-Puro |
| pLV3-U6-MGLL(human)-sgRNA1-Cas9-Puro |
| pLV3-U6-Eif4a1(mouse)-sgRNA2-Cas9-EGFP-Puro |
| pLV3-U6-Eif4a1(mouse)-sgRNA1-Cas9-EGFP-Puro |
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文献和实验and homologous recombination. These tools provide researchers with new instruments that accelerateboth forward and reverse genetics efforts. Key words Genome engineering , Cas9 , CRISPR , CRISPR-Cas9 , PAM , Guide RNA , sgRNA , DNA cleavage , Mutagenesis
：pCas9/gRNA1 载体本身不带筛选标签。我们用带有嘌呤霉素和 EGFP 标签的载体 pLV-EGFP（2A)puro 和 pCas9/gRNA1 载体共转染，再用嘌呤霉素筛选转染成功的细胞。 简要步骤 设计靶点→构建 pCas9/gRNA1 载体→pTYNE 验证靶点→pCas9/gRNA1 载体转染 293T 细胞→挑选培养细胞克隆→测序验证基因敲除 靶点设计和基因敲除载体构建 人 TP53 基因有多个 mRNA 和蛋白拷贝，2 个转录起始位点，以及多个
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是神经特异的，动物脑实验常用。标签和报告基因（EGFP/mCherry/Luciferase）按检测手段配，做免疫荧光就别让载体荧光和你的染色通道撞车。对照一定要齐：过表达对照 MCS 处不插片段，干扰/敲除对照插一段无义靶点，正式实验没对照等于没做。 步骤 4-5：包病毒和感染/注射 策略定完，细胞实验要长期稳定表达就包慢病毒；只想快速看个表型用腺病毒；动物体内直接上 AAV。超过 4kb 的大基因用 GV747 大基因载体，T/NK 这类悬浮难转染细胞用悬浮细胞专用慢病毒。感染细胞前，先用带荧
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