- ￥1984 - 6551
- Sigma-Aldrich
- 美国
- I9148
- 2025年08月01日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
见产品包装
- 库存：
990
- 供应商：
亦高生物
- CAS号：
305-53-3
- 规格：
I9148-5G/I9148-25G
| 规格： | I9148-5G | 产品价格： | ￥1984.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | I9148-25G | 产品价格： | ￥6551.0 |
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文献和实验本法是以 NaIO ４ 先将 HRP 表面的糖分子氧化成醛基，然后再与 Ig 上的氨基相结合，所获酶标记抗体的产率高，将近 70 ％的 HRP 和 Ig 结合， 99 ％的 Ig 与酶结合，酶与 Ig 的活性无重大损失，是目前最常用的方法。 1. 原理：经典的过碘酸钠法中需采用二硝基氟苯封闭 HRP 上残留的α - 和ε氨基基以避免酶分子之间的交联。后来 Wilson 等改用在低 PH 下使 NaIO ４氧化 HRP ，从而省去了二硝基氟苯封闭 HRP 步骤
改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基，再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联，在标记前先用2，4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后，再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L，pH5.6醋酸盐缓冲液1ml中，加入1%DNFB无水乙醇溶液0.1ml，室温下轻微搅拌1h
戊二醛二步法 1. 原理：戊二醛为一种双功能 试剂 ，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2. 标记步骤： (1) 称取HRP25mg溶于1.25％戊二醛溶液中，于室温静置过夜。 (2) 反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱，用生理
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