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100
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Collagenase, Type 1
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2年
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艾美捷科技
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2-8°C.
胶原酶原料认证:
粗胶原酶制剂含有两种不同胶原酶的几种亚型,一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨基肽酶。这种胶原溶解和蛋白水解活性的组合可有效分解细胞间基质,这是组织解离的重要组成部分。该复合物的一种成分是水解酶,其优先降解天然胶原蛋白中的螺旋区域,优先在序列Pro-Y-Gly-Pro中的Y-Gly键处降解,其中Y通常是中性氨基酸。这种裂解产生易受进一步肽酶消化的产物。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制,但不受DFP抑制。它还被α2-巨球蛋白(一种大的血浆糖蛋白)抑制。Ca2+是酶活性所必需的。每种胶原酶的特定酶谱与获得待研究细胞的组织(或与细胞的用途)相关,并且由于相关性,Worthington已经建立了几种类型的粗胶原酶:类型1,2,3和4。
1型粗胶原酶具有胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
2型含有较高水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。
3型含有最低水平的二级蛋白酶。
4型胰蛋白酶活性特别低,以限制对膜蛋白和受体的损伤。
5型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。
6型含有高胶原酶活性,酪蛋白酶与胶原酶的比例~2:1。设计用于富集相对于 I 型胶原酶 II 型(col H)胶原酶(col G)。
7型胶原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型胶原酶高四倍。 纯化的胶原酶,代码:CLSPA,含有最少的二级蛋白水解活性以及高胶原酶活性。
艾美捷科技作为Worthington全国总代理,为您推荐Worthington主要产品胶原酶。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
| 热销产品 【5698篇文献】 | 货号 |
| 胶原蛋白酶Collagenase(Type 1-7) | WBC-LS005337 |
| 弹性蛋白酶Elastase | WBC-LS002292 |
| 木瓜蛋白酶papain | WBC-LS003118 |
| 脱氧核糖核酸酶I | WBC-LS002138 |
| 胰蛋白酶Trypsin | WBC-LS003708 |
新增功能! 无动物型 AFA、AFB 和 AFC、STZ1 和 STZ2 胶原酶来源于在完全不含动物成分的培养基中生长的培养物,专为必须防止引入潜在动物源性病原体的生物工艺应用而设计。二级蛋白酶的水平与1型和2型胶原酶相似。
CLSAFA 是最初的 AFA 等级,旨在具有类似于 1 型和 2 型胶原酶的胶原酶和二级蛋白酶。
CLSAFB含有比CLSAFA更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。
CLSAFC具有特别低的胰蛋白酶活性,类似于4型胶原酶。
STZ1 和 STZ2,0.22μ 过滤 STEMxyme? AOF 胶原酶/中性蛋白酶(Dispase?)混合物,用于原代和干细胞分离。
胶原酶测定是Mandl的修饰,其中胶原酶与天然胶原蛋白一起孵育五小时,并使用Moore和Stein,JBC,176,367,(1948)比色茚三酮方法确定胶原蛋白分解的程度。释放的氨基酸以每毫克胶原酶的微摩尔亮氨酸表示。Worthington还提供预包装形式的每种类型的0.22μm过滤制剂,用于直接复溶并用于细胞分离和培养程序。酶类型和不同组织的有效性之间的相关性一直很好,但并不完美,部分原因是使用参数可变。然而,大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。沃辛顿胶原酶和污染物测定的详细描述可以在沃辛顿酶手册中找到。此外,组织特异性参考文献和详细的分离条件可在沃辛顿组织解离指南中找到。
胶原酶用途:
粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织解离程序。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂,如1型、2型、3型和4型或色谱纯化的胶原酶(代码:CLSPA);后者通常与弹性蛋白酶、透明质酸酶等次级酶结合。为了获得最佳结果,蛋白水解活性的精确混合物必须针对要解离的组织进行调整。不同组织的类型和有效性之间的相关性一直很好,但并不完美,并且可能部分取决于使用参数和目标以及批次间的变化。
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文献和实验Collagenase(Type 1-7)
Abe, S. and Nagai, Y. Evidence for the Presence of a Complex of Collagenase with alpha-2-Macroglobulin in Human Rheumatoid Synovial Fluid: A Possible Regulatory Mechanism of Collagenase Activity , J. Biochem. 73 , 897 , 1973
Adams, E. , Antoine, S. and Golstein, A. Collagenase Action on the Synthetic Tripeptide Polymers, (Gly-Pro-Ala)n and (Gly-Ala-Pro)n , Biochim Biophys Acta 185 , 251 , 1969
Ala-aho, R. and Kahari, V. Collagenases in Cancer , Biochimie 87 , 273 , 2005 Amsterdam, A. and Jamieson, J. Studies on Dispersed Pancreatic Exocrine Cells. II. Functional Characteristics of Separated Cells , J Cell Biol 63 , 1057 , 1974
特征,人体中硬块出现于48~72h,此反应由CD4Th和CD8CTI。共同介导。 Thl细胞抗原应答中产生的细胞因子引起Ⅳ型超敏反应 抗原刺激后的Thl细胞分泌的趋化因子和细胞因子引起迟发型超敏反应。局部组织中的抗原可被APC加工并由MHCⅡ类分子提呈。能识别注射部位抗原的抗原特异性Thl细胞所释放的趋化因子和细胞因子可招募M中到抗原出现的部位,它们对抗原的提呈促进了上述反应。T细胞产生的TNF-α和TNF-β还可作用于局部血管
Ⅲ型超敏反应的发病机制 Ⅲ型超敏反应或免疫复合物型超敏反应,是抗原抗体复合物沉积于组织内,通过激活补体而引起的细胞组织损伤。免疫复合物沉积的部位一方面取决于抗原在组织中的分布,同时也与循环免疫复合物在某些部位容易滞留有关。大的复合物可被肝、脾和骨髓中M甲捕获并清除,小的复合物存在于血循环中,但不会沉积,只有大小合适的复合物才能在局部滞留并活化补体系统,主要好发生在血管、肾赃、肺部、皮肤和关节等处。 组织局部免疫复合物沉积引起Ⅲ
1.输血反应:可由AB0血型不合和Rh血型不合的输血引起红细胞溶解。HLA型别不同的输血可使体内产生抗白细胞、血小板抗体,产生非溶血性输血反应。通过血型鉴定选择同型血输入可避免AB0血型不合的输血反应。 2.新生儿溶血症:主要见于母子间Rh血型不合的第二胎妊娠。血型为Rh阴性的母亲因流产或分娩过Rh阳性的胎儿时,Rh阳性RBC进入体内产生了抗Rh抗体(IgG类),当她再次妊娠Rh阳性的胎儿时,母体内的抗Rh抗体可通过胎盘进入胎儿体内,与胎儿Rh阳性RBC结合,通过激活补体和调理
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