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- 细胞耐药性即细胞抗药性，一般指肿瘤细胞对化疗药物产生的耐受和抵抗能力。肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一。体外建立肿瘤细胞耐药模型是研究肿瘤多药耐药（MDR）的重要手段。耐药细胞株的构建就是诱导肿瘤细胞对特定药物产生耐药性，杀死敏感细胞，从而构建对特定药物产生耐药性的肿瘤细胞株，随后具有抗性的细胞经大量繁殖后，产生具有特定药物抗性的后代，使得药效大幅度下降。
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- 2025年09月26日
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- 提供商：
武汉伯远生物技术有限公司
- 服务名称：
耐药细胞株构建
背景说明
肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一。体外建立肿瘤细胞耐药模型是研究肿瘤多药耐药（MDR）的重要手段。耐药细胞株的构建就是诱导肿瘤细胞对特定药物产生耐药性，杀死敏感细胞，从而构建对特定药物产生耐药性的肿瘤细胞株，随后具有抗性的细胞经大量繁殖后，产生具有特定药物抗性的后代，使得药效大幅度下降。
图 耐药细胞株构建流程（Amaral et al., 2019）
已知的体外建立耐药细胞株主要有以下几种方式：大剂量药物冲击法、药物浓度递增法、药物浓度递增与大剂量药物冲击相结合法、转基因结合药物筛选法，也有人采用逆转录病毒转染法。
细胞耐药性鉴定
耐药倍数鉴定：可 选用MTT、CellTiter-Glo（CTG）发光法等鉴定方法，检测药物对亲本细胞和耐药细胞的IC50值，计算耐药指数（RI），RI>5则认为耐药性符合要求。
耐药相关蛋白鉴定：可选取Western blot、PCR、流式细胞术（FCM）、免疫学等多项鉴定方法。常用检测指标主要有P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药蛋白1（MDR1）等。
我司采取的耐药细胞构建方法
药物浓度递增法
优点：诱导耐药细胞的药物剂量循序渐进，细胞培养的外环境逐渐改变，细胞较易耐受，状态较好；
缺点：诱导耐药过程耗时很长，且其化疗药物的作用方式与临床上化疗药物大剂量短疗程的化疗原则存在一定差异。
大剂量药物冲击法
优点：与临床上大剂量化疗药物冲击的治疗方式相接近；
缺点：药物浓度高，细胞由于外环境骤变，可能难以耐受，细胞状态较难控制，且耐药性能不稳定。
服务流程
服务内容及说明
适用范围
不同肿瘤细胞对不同化疗药物耐药株的筛选。
客户下单及项目信息填写
在我司官网进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息，提交项目所需要的具体信息，包括：
1、细胞类型与名称；
2、药物名称、药物溶解性等；
3、检测方法；
4、 尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。
实验周期
致电详询
实验交付与标准
1、所有实验的原始数据（包括实验过程、实验试剂与设备等）；
2、鉴定报告与结果分析（包括耐药指数、细胞形态图、qRT-PCR与蛋白鉴定等）；
3、耐药细胞株以及亲本细胞株各2份。
参考文献
Amaral MVS, DE Sousa Portilho AJ, DA Silva EL, et al. Establishment of Drug-resistant Cell Lines as a Model in Experimental Oncology: A Review. Anticancer Res. 2019;39(12):6443-6455.
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文献和实验Amaral MVS, DE Sousa Portilho AJ, DA Silva EL, et al. Establishment of Drug-resistant Cell Lines as a Model in Experimental Oncology: A Review. Anticancer Res. 2019;39(12):6443-6455.
w_dennis 请教各位高人前辈，有做过基因的部分核苷酸缺失后，回补株构建实验吗？如何操作？ 请教下pBAD/gⅢ和pBR322质粒构建回补株的原理？叩谢！！:) woxingwosu 看看这个有没有帮助了： http://journal.shouxi.net/qikan/article.php?id=534304 w_dennis 谢谢，请问有pBAD/gⅢ和pBR
1. 2 稳定转染细胞株的构建 原理： 稳定转染，就是转染的质粒DNA 整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可 长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。 应用： 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究） 一般流程：
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