- ￥345 - 667
- gelatins/江蓝纯
- JC_CC5589
- 国内
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
HotStart Taq DNA polymerase(含预混Mg2+的10 × Taq Buffer)
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
250 U, 2.5 U/ul / 500 U, 2.5 U/ul
| 规格： | 250 U, 2.5 U/ul | 产品价格： | ￥345.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500 U, 2.5 U/ul | 产品价格： | ￥667.0 |
HotStart Taq DNA polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Buffer)
产品特点
Hotstart Taq Plus DNA Polymerase 是抗 Taq 单克隆抗体修饰的热启动酶，高温加热前，抗 Taq 单克隆抗体与 Taq 聚合酶结合从而抑制聚合酶的活性，达到抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增作用。当扩增反应体系被加热到95°C 2 min 时，聚合酶活性因抗 Taq 单克隆抗体变性而得到恢复，因此无需特殊失活处理，在常规 PCR 反应条件下即可使用。可应用于热启动 PCR，扩增复杂模板，低拷贝目的片段扩增。
成分规格
|
产品组成 |
规格 |
|
HotStart Taq DNA polymerase |
250Ｕ/ 2.5U/μl |
|
10 × Taq Buffer（含 Mg2+） |
1m / 2*1 ml |
|
-20℃，有效期 1 年 | |
|
本产品仅供科研使用，不得用于其它用途 | |
使使用方法
（注 意：以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、
引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1. PCR 体系：
推荐体系（50μl）
|
试剂 |
用量 |
|
模板 DNA |
< 1μg |
|
10 × Taq Buffer |
5μl |
|
dNTP Mixture(2.5 mM each) |
4μl |
|
Primer 1 (10 μM) |
2μl |
|
Primer 2 (10 μM) |
2μl |
|
Hotstart Taq DNA Polymerase (2.5 U/μl) |
0.5 ~ 1μl |
|
ddH2O |
Up to50μl |
注 意：
A. 引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
B. 镁离子浓度请以终浓度 1.5-3mM 作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板来调节镁离子浓度，由此优化反应体系）
2. PCR 程序
|
过程 |
温度 |
时间 | |
|
预变性 |
94℃ |
5min | |
|
25－35cycles |
变性 |
94℃ |
30sec |
|
退火 |
55-65℃ |
30sec | |
|
延伸 |
72℃ |
1kb/30sec | |
|
终延伸 |
72℃ |
5min | |
注 意：
a. 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
b. 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Hotstart Taq Plus DNA Polymerase 的扩增效率为 1 kb/30 sec。
C. 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）
3. 结果检测：
反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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文献和实验of a master mix containing water, buffer, dNTPs, primers and Taq DNA Polymerase in a single tube, which can then be aliquoted into individual tubes. MgCl2 and template DNA solutions are then added. This method of setting reactions minimizes the possibility
This is a protocol from Engelke et.al.(1990)which was modified by Dr.Baron.The enzyme has been used for RT-PCR,genotyping and cloning.Solutions1000X IPTG0.5M IPTG 1.19g IPTGup to 10 ml wih sterile Qfilter and store at -20℃Buffer A50 mM Tris 7.9 25
Dideoxy Sequencing Reactions Using Taq Polymerase
Tuq DNA polymerase is a highly stable polymerase isolated from the thermophilic organism Thermus aquaticus . Because of its unique properties this enzyme has been extensively used for amplification of DNA fragments by the polymerase chain
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