- ￥803
- Thermo Fisher
- 11058021
- 2025年08月07日
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11058021
Opti-MEM™ I 减血清培养基是一种经过改良的最低必需培养基 (MEM)，能够使胎牛血清添加量减少至少 50%，而细胞生长速率或形态无变化。还推荐 Opti-MEM™ I 培养基与阳离子脂质体转染试剂（如 Lipofectamine™ 试剂）配套使用。Opti-MEM™ I 培养基可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞，包括 Sp2、AE-1、CHO、BHK-21、HEK 和原代成纤维细胞。针对广泛的细胞培养应用，我们提供多种改良型 Opti-MEM™ I 减血清培养基。
这种 Opti-MEM™ 的改良方式如下：
包含 不含
•L-谷氨酰胺 • 酚红
使用 Opti-MEM™ 减血清培养基
Opti-MEM™ I 培养基是一种含有胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素的独特培养基。这些附加组分可使血清添加量减少至少 50%。Opti-MEM™ I 使用碳酸氢钠缓冲系统 (2.4 g/L)，因此需要 5–10% CO2 环境来维持生理 pH 值。
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文献和实验1.实验动物 产蛋期母鸡（动物实验中心购买），普通饲料喂养，自由进食进饮；实验前禁食12h 2.主要试剂及仪器 EDTA-2Na购自国药集团化学试剂有限公司；双抗购自Hyclone公司；M199培养基、胎牛血清及Ⅱ型胶原酶均购自美国Gibico 公司；CO2恒温培养箱购自美国Thermo公司 3.实验步骤 A. 翅下静脉注射2mL EDTA-2Na（W/V，2%）溶液处死母鸡，新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min，打开腹腔，剪取整个卵巢，小心剥离卵泡（以8-15g为最佳），置于装有PBS
板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml
人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
细胞悬浮液。 在 37°C 下孵育。 4. 每隔一天更换一次培养基，直到第 20-25 天。 由于类器官处于悬浮培养中，因此请根据方案进行培养基更换： 1. 使用 1 mL 玻璃血清移液器将漂浮的类器官转移到无菌的 15 mL 锥形管中。等待 10 分钟，使类器官沉淀到试管底部。 2. 将 2 mL 吸液管连接真空泵。在 2 mL 吸气移液器上，连接一个无菌的 20 μL 非屏障移液器枪头。小心地吸出培养基。注意在类器官上方留下少量培养基作为缓冲液，以避免干扰类器官。
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