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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
- 肿瘤类型:
详见说明书或咨询客服
- 细胞类型:
详见说明书或咨询客服
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
正常肺动脉组织
- 相关疾病:
详见说明书或咨询客服
- 物种来源:
小鼠
- 免疫类型:
详见说明书或咨询客服
- 细胞形态:
长梭状,不规则细胞
- 是否是肿瘤细胞:
详见说明书或咨询客服
- 器官来源:
详见说明书或咨询客服
- 运输方式:
常温
- 年限:
不限
- 生长状态:
详见说明书或咨询客服
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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小鼠肺动脉外膜成纤维细胞
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组织来源
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正常肺动脉组织
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商品货号
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ORCM332
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种属来源
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小鼠
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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细胞简介
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肺动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成,三层紧密贴合在一起。其中,外膜是专门的支持组织,外膜成纤维是外膜的主要成分,在血管炎症反应、血管重塑等方面发挥重要作用。
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培养基
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原代成纤维细胞培养体系
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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贴壁
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细胞形态
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长梭状,不规则细胞
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传代特性
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根据细胞特性
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;
3)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37°C温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,收集细胞沉淀;
5)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充
新鲜的完全培养基至5mL,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
6)待细胞状态稳定后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
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文献和实验于 4% 多聚甲醛内4度后固定 4-6 个钟头。 四、难点与关键点 将灌注针插入主动脉内是灌注固定的关键,也是难点。首先准确找到主动脉,这是此步骤的要点。可用温生理盐水将胸腔内的血液冲洗干净,用眼科镊子轻轻夹住心 外膜(夹的越少越好,以免影响取材)将心脏向左上方提起,即可看清主动脉,又可使灌注针很容易地插入主动脉内。 插入时动作要慢,针尖方向不要偏向右侧,以免刺入右心房,如果感到有阻力,则将针退后、调整方向重新进针,直到进入主动脉,灌注针进入主动脉后可在心脏的上方看到其位置,灌注针进入主动脉的长度
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
培养基。放入37℃,5%CO2培养箱中培养。72h后细胞从环内外生长迁出,环内为内皮细胞,环外为成纤维细胞。将动脉环除去后,可看到内膜面细胞集落与外膜面之间有明显的无细胞区界限,用玻璃针剔除成纤维细胞,得到纯的内皮细胞生长克隆。继续培养10~15d,此时FBS浓度为20%,形成细胞单层。 4、置于5%CO2孵箱中培养,每隔3天换液,培养时添加15% FBS,5~10μg/ml的内皮细胞生长因子(ECGF)以及100μg/ml的肝素。待细胞90%~95%融合时,0.25胰蛋白
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