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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
59
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
长梭状,不规则细胞
- 物种来源:
小鼠
- 组织来源:
正常肺动脉组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
肺动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成,三层紧密贴合在一起。其中,外膜是专门的支持组织,外膜成纤维是外膜的主要成分,在血管炎症反应、血管重塑等方面发挥重要作用。
基本信息:
细胞名称:小鼠肺动脉外膜成纤维细胞
组织来源:正常肺动脉组织
商品货号:YS-01X8194
种属来源:小鼠
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:
培养基:原代成纤维细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:长梭状,不规则细胞
传代特性:根据细胞特性
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞试用的实验类型:
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
公司正在出售的产品:
| 人外周血淋巴细胞系;U266B1 | 整合素连接激酶ILK封闭多肽 |
| 人视网膜上皮细胞;ARPE-19 | A型流感病毒H5N1凝集素封闭多肽 |
| 抗鼠CD4单克隆细胞;YTS191.1.2 | 羧肽酶A2封闭多肽 |
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| 人肺巨细胞癌高转移系;PGBE1 | 谷氨酸受体1封闭多肽 |
| 抗鼠CD4单克隆细胞;YTA3.1.2 | 抗Ⅵ型胶原封闭多肽 |
| 人宫颈癌细胞;Hela229[HeLa229] | FAM167B蛋白封闭多肽 |
| 人骨肉瘤细胞;HOS | 多聚合酶α封闭多肽 |
| 人胚肾细胞-F克隆;293F | 重组人瘦素蛋白 |
| 人肺癌细胞/5Fu耐药株;A549-5Fu | 小鼠肺动脉外膜成纤维细胞重组登革热多表位抗原epi-10 |
| 小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP | 驱动蛋白轻链3封闭多肽 |
| 小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP | 胰岛素基因增强结合蛋白1封闭多肽 |
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤
掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色
偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验于 4% 多聚甲醛内4度后固定 4-6 个钟头。 四、难点与关键点 将灌注针插入主动脉内是灌注固定的关键,也是难点。首先准确找到主动脉,这是此步骤的要点。可用温生理盐水将胸腔内的血液冲洗干净,用眼科镊子轻轻夹住心 外膜(夹的越少越好,以免影响取材)将心脏向左上方提起,即可看清主动脉,又可使灌注针很容易地插入主动脉内。 插入时动作要慢,针尖方向不要偏向右侧,以免刺入右心房,如果感到有阻力,则将针退后、调整方向重新进针,直到进入主动脉,灌注针进入主动脉后可在心脏的上方看到其位置,灌注针进入主动脉的长度
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊,更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期,谢谢! zhujoker 估计都没人做过,你如果需要观察其生物学功能,就自己做一次,也算原创了啊! freecell 这里有: http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意
培养基。放入37℃,5%CO2培养箱中培养。72h后细胞从环内外生长迁出,环内为内皮细胞,环外为成纤维细胞。将动脉环除去后,可看到内膜面细胞集落与外膜面之间有明显的无细胞区界限,用玻璃针剔除成纤维细胞,得到纯的内皮细胞生长克隆。继续培养10~15d,此时FBS浓度为20%,形成细胞单层。 4、置于5%CO2孵箱中培养,每隔3天换液,培养时添加15% FBS,5~10μg/ml的内皮细胞生长因子(ECGF)以及100μg/ml的肝素。待细胞90%~95%融合时,0.25胰蛋白
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