- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y75258
- 国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
48
- 英文名：
PTI-428
- CAS号：
1953130-87-4
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
5mg 10mg 50mg 100mg
| 产品名称 | PTI-428 | 产品货号 | CS-01Y75258 |
| 规格 | 5mg 10mg 50mg 100mg | CAS号 | 1953130-87-4 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C18H18N4O4 |
| 分子量 | 354.36 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
PTI-428规格：5mg 10mg 50mg 100mg
CAS：1953130-87-4
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C18H18N4O4
分子量：354.36
溶解度：DMSO : 250 mg/mL (705.50 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
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产品描述:
PTI-428 is a specific cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) amplifier[1]. CFTR[1][1]. Mijnders M, et al. Correcting CFTR folding defects by small-molecule correctors to cure cystic fibrosis. Curr Opin Pharmacol. 2017 Jun;34:83-90.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Recombnant Human FLT3LG proten ,C- H Tag | Phospho-PDPK1 (Ser393) Antibody Blocking Peptide |
| Recombinant Human Proteasome subunit beta type 2 | Recombinant Mouse DNAM-1/CD226 protein , C- His Tag |
| Claudin 22 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human CSF1R protein |
| NAALAD2 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human FOXP2, N-His |
| MARCH5 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human PSPN, N-His |
| GATA2 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human UBTF protein,N-His Tag |
| GPS2 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human PTH protein ,No Tag |
| ATG13 Antibody Blocking Peptide | 大肠癌相关蛋白封闭多肽 |
| C8orf44 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human CD100/SEMA4D, C-His |
| FHL1 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human SAA4 protein ,C- His Tag |
| RASSF1A Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human KRT4, N-His |
| SCGB1A1 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human REXO2, N-His |
| VANGL2 Antibody Blocking Peptide | PTI-428Recombinant Human ARPC4, N-His |
| LYPD6 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human ADAMTS13, N-His |
| ZNF44 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human CD223/LAG3, C-His |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验植物通过模式识别受体(PRRs)识别环境中潜在的病原体，这些受体和微生物的保守结构病原相关分子模式(PAMPs)相互作用。这里将示范一个基于细胞死亡的PAMPs分子引发的植物免疫反应实验。 0:05 植物病原体相关分子模式触发的免疫反应(PTI)实验 5 0:08 内容简介8 0:34 预备PTI 34 3:26 引发PTI 206 5:20 挑战接种320 6:32 PTI引发的病原体非致病计分392 7:33 代表性结果453 8:12 结论492 植物病原
不论是在临床生物化学还是在环境化学和 食品工业中都具有重要意义。 血红素是一活性分子，而血清白蛋白具有极强吸附能力，所以两者能结合。由于含有血红素，该结合物就具有过氧化物酶的特性。琼脂糖凝胶在激活后能很好的吸附蛋白质分子从而把蛋白质分子（模拟过氧化物酶）固定。过氧化物酶能极敏感的催化过氧化氢分解从而使邻苯二胺变成有色物质2，3-二氨基吩嗪，反应如下： 产物2，3-二氨基吩嗪在428nm处有光吸收峰，所以能以此反应来测定过氧化物酶的活性和检测
；解吸反吹气流量：40mL/min，吹5 min；PTI进样口温度：100 oC。在最佳反应及仪器条件下，在15mL吹扫瓶内反应吹扫各甲基锡（浓度均为1ng/mL）色谱分离见图2.。一甲基锡、二甲基锡、三甲基锡十次测定的相对标准偏差分别为2.1%，2.8%，3.5%，该方法可用于青岛污水处理厂附近海水中甲基锡的测定，加标回收率可达93-106%，测定结果一甲基锡(MMT)、二甲基锡(DMT)、三甲基锡(TMT)分别为122ng/mL，94ng/mL，83ng/mL
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