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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 保质期:
见标签
- 供应商:
Gibco
- 规格:
500mL
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一种广泛使用的基础培养基,可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长。已经在 DMEM 中成功培养出的细胞包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞,以及 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等细胞系。针对广泛的细胞培养应用,提供了多种组分的 DMEM 改良培养基。使用培养基选择工具查找适合的配方。
这种 DMEM 的改良方式如下:
包含 不含
•L-谷氨酰胺
•葡萄糖
•酚红
•丙/酮酸钠
• HEPES
可提供完整配方。
使用 DMEM
DMEM 与其他培养基的不同之处在于其含有相当于初始 Eagle 最低必需培养基 4 倍浓度的氨基酸和维生素。DMEM 最初采用低浓度葡萄糖 (1 g/L) 和丙/酮酸钠配制,但通常在含/不含丙/酮酸钠的高糖环境下使用。DMEM 不含蛋白质、脂质或生长因子。因此,DMEM 需要补充营养成分,通常需要添加 10% 胎牛血清 (FBS)。DMEM 使用碳酸氢钠缓冲系统 (3.7 g/L),因此需要 5–10% CO2 环境来维持生理 pH 值。
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文献和实验,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
蛋白产品货号 基础培养基 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 DMEM-F12 penicillin-streptomycin penicillin 100U/ml, streptomycin 100μg/ml dFBS(v/v) - 0.2% 2% 2% - L-glutamine 2mM B-27
缓慢滴加 650μl 预热的类器官培养基,确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃,5%CO2 的培养箱中培养,每 2-3 天更换培养基(用于换液的类器官培养基内不含 Y27632)。 类器官传代 14、吸出类器官培养液,机械分离 Matrigel,然后加入 500μl 胰蛋白酶,放置于 37℃ 培养箱中孵育 1-2min 后,用移液器多次吹打,从基质胶中释放类器官。 15、用含有 10%FBS 的 DMEM/F12 培养基终止消化,在 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 16、用冷 PBS
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