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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
PROTEASE INHIBITOR COCKTAIL, MAMMALIAN
- 库存：
1
- 供应商：
甄准生物
- 保存条件：
FROZEN
- 规格：
1ML
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文献和实验，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该
核蛋白提取 实验准备： 1 4℃离心机 2 根据标本数计算所需I，II，III，IV总体积，取出液体，并加入蛋白酶抑制剂，（III由加蛋白酶抑制剂I与加蛋白酶抑制剂II混合物） 实验操作： 1 收集细胞。10ml 对照细胞（1-2*105/ml ）培养48h后，15ml 离心管收集，300g（1370 rpm）* 5min。弃上清，加1ml 1*PBS轻轻涡旋混匀后转移至1.5ml EP管。 2 4℃，300g * 5min，弃上清。 3 重悬
X 蛋白酶抑制剂混合物 PIC＃7012 和 10X 甘氨酸溶液＃7005，直到完全溶解。配制 ChIP 样品制备所需要的各种试剂：包括：缓冲液 A（主要是对细胞膜进行裂解，同时对核膜进行打孔，以便于后续微球菌核酸酶进入核内发挥酶解作用）：我们按照实验设计，需要配 3 倍反应需要的体积，同时加入合适的 DTT 和 200X 蛋白酶抑制剂混合物（PIC），在冰上预冷。按照说明书的描述，每 4X 106 细胞，准备 1 ml 1X 缓冲液 A（250 ul 4X 缓冲液 A #7006+750ul 水
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