裸鼠肺癌原位移植瘤模型

（一）目的：

建立实验室动物建模的标准操作规程。

（二）适用范围：

本SOP适应于科沿有道实验室动物实验所有工作人员。

（三）主体内容：

肺癌作为第二大最普遍的恶性肿瘤，其死亡率在世界范围内仍然居高不下。据统计，非小细胞肺癌则占据了肺癌总病例的85%，其中包括鳞状细胞癌、腺癌和大细胞癌。在目前的治疗方式下非小细胞肺癌的5年存活率仅为15%，更安全有效的治疗方式被迫切需要。在肺癌的新型治疗方法的研究中1个主要的障碍是缺乏简便易行的、可重复的、临床相似度更高的动物模型。原位移植瘤和异位移植瘤相比，其优点在于肿瘤细胞生长的微环境与肺癌临床情况相符合。在曾经常用的皮下移植瘤模型中，一些抗转移的药物缺乏响应，使得原位移植瘤模型更受到药物试验的推崇。已经有很多种肺原位移植瘤模型的建立方法被报道，最常用的方法包括经气管细胞注射法和经胸壁细胞注射法。

1.实验动物： 品系：Balb/C-nude小鼠； 性别：雌雄不限； 周龄：6-8周； 体重：18-20g。 2. 操作流程：

1）动物适应性饲养7天；

2）裸鼠以麻醉机麻醉后固定，消毒皮肤后，于颈部气管正上方剪开一个约1cm 的小口，钝性分离气管周围肌肉，暴露气管。注射器准确吸取50μL（细胞量5×10^6）均一的细胞悬液后，穿入气管0.5~1.0cm，竖立裸鼠，缓慢注入细胞，完成后保持竖立姿势2~3min。复原气管周围组织，缝合伤口。

3.实验结果：

1）裸鼠手术后喂养6 周后或出现明显的体重下降且≥3g，精神倦怠，皮肤变得粗糙等恶病质表现时予以麻醉处死，取肺观察有无结节出现。

2）4%多 聚 甲 醛 吹肺并固定，石蜡包埋切片，HE染色并观察形态。