裸鼠胰腺癌原位移植瘤模型

（一）目的：

建立实验室动物建模的标准操作规程。

（二）适用范围：

本SOP适应于科沿有道实验室动物实验所有工作人员。

（三）主体内容：

胰腺癌（pancreatic cancer）是一种恶性程度很高的肿瘤，其突出的特征是发现较难、早期转移，预后较差。裸鼠先天性T淋巴细胞缺陷，诱导产生的体液免疫应答较弱，可在裸鼠体内移植成功。利用裸鼠建立的人胰腺癌裸鼠原位移植瘤，呈圆形、椭圆形或呈分叶状，少数移植瘤有完整的泡膜形成，大多数移植瘤与周围组织粘连，无完整的泡膜形成，瘤体周围血管丰富。

1.实验动物：

品系：Balb/C-nude小鼠；

性别：不限；

周龄：6-8周；

体重：18-20g。

2. 操作流程：

1）动物适应性饲养7天；

2）皮下移植瘤模型：75% 酒精棉球消毒裸小鼠皮肤, 将( 2~3) ×10^6 ( 0.2ml)的单细胞悬液接种于裸鼠右肩背部皮下，建立皮下移植瘤模型。密切观察皮下肿瘤生长情况，每周用游标卡尺测量肿瘤大小，按公式V=1/2长径×短径^2，计算肿瘤体积，并绘制皮下移植瘤生长曲线。

3）原位移植瘤模型：3周左右待皮下移植瘤长至1cm 大小时，颈椎脱位法处死皮下荷瘤鼠，消毒皮肤，取下肿瘤，浸入含100 U/mL青霉素和100 ug/mL链霉素的高糖DMEM无血清培养基，去除中央坏死组织，选取周围健康肿瘤组织，剪成大小约1立方毫米瘤块供原位移植用。麻醉机麻醉裸鼠，75%酒精消毒皮肤，左上腹直肠旁线处行1cm 的纵行切口，仔细分开胃与脾之间的薄膜，暴露胰腺，剪开胰腺被膜，将1立方毫米瘤块植入胰体尾处，以8-0 可吸收外科缝线缝合胰腺被膜。将胰腺轻轻送回腹腔，6-0可吸收外科缝线单层缝合腹壁肌层及皮肤。 

3.实验结果鉴定：

8周后，摘取移植瘤，福尔马林固定，石蜡包埋，进行HE染色。