PAS染色

一、技术简介：

PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain）又称过 碘 酸雪夫染色，糖原染色。在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。过 碘 酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。PAS染色一般用来显示糖元和其它多糖物质。随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究，糖尿病的诊断和研究，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外，还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。为临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据。

二、实验原理 ：

过 碘 酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色定位于胞浆上。

三、实验步骤：

1. 石蜡切片脱蜡至水（细胞涂片，冰冻切片直接水洗）；

2. 蒸馏水洗；

3. 过 碘 酸酒清夜10min；

4. 自来水冲洗10min；

5. Schiff氏液10min；

6. 流水冲洗5min；

7.Mayer苏木素复染2min，自来水冲洗至细胞核变蓝；

8. 流水冲洗5min；

9. 常规脱水、透明、封固。

四、结果判读：

PAS阳性为红色，细胞核蓝色。

五、注意事项：

1，切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。

2，过碘 酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18-22℃最佳。

3，过碘 酸溶液和Schiff  Reagent应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前，最好提前30min取出恢复到室温后，避光暗处使用。

4，酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织类别和酸性乙醇分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。

5，过碘 酸溶液和Schiff  Reagent作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织的类别等决定。

6，冷冻切片染色时间应尽量短。