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- 2025年07月13日
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- 英文名：
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×,pH6.8)优惠价格
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999
- 供应商：
上海圻明
- 规格：
100ml,500ml
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×,pH6.8)优惠价格购买欢迎来电垂询，上海圻明生物优势现货供应。
产品应用PCR、定量PCR、蛋白电泳纯化、克隆工具酶系列等。更多产品资料欢迎免费索取。
1. 使用前将 Calcein AM 和 EthD-1 溶液瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. Calcein AM 和 EthD-1 为荧光染料，均存在荧光淬灭的可能性，实验操作时注意尽量避光，以减缓荧光淬灭。
3. Calcein AM 需要保存在封闭、干燥的环境中，在潮湿环境容易水解，因此建议首次使用按照实验需求进行分装（本产品的包装袋中放置了干燥剂，分装后建议放回原包装袋，
密封保存）。
4. Calcein AM 在水溶液中容易水解，因此 Calcein AM 工作液必须现配现用。
5. 血清对细胞染色有一定的干扰，建议实验时尽量用不含血清的缓冲液。
1) 准备染色工作液及按上述步骤染色细胞。另外，分别准备 1 ml 2μM Calcein AM
和 4μM EthD-I 溶液，按照下列组别进行染色。对于下面组别的细胞或无细胞
组，需要保持检测工作液浓度、孵育时间和孵育温度的完全一致。
2) 样品组及对照组测量：
A. 样品组在 645 nm 处的测量值，记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(645)sam。
B. 样品组在 530 nm 处的测量值，记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(530)sam。
C. 死细胞 EthD-1 单染对照组在 645 nm 的测量值，记为 Calcein AM =F(645)max。
D. 死细胞 Calcein AM 单染对照组在 645 nm 的测量值，记为 Calcein AM =F(645)min。
E. 活细胞 EthD-I 单染对照组在 530 nm 的测量值，记为 EthD-I=F(530)min。
F. 活细胞 Calcein AM 单染对照组在 530 nm 的测量值，记为 Calcein
AM=F( 530 ) max。
G. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可)，530 nm 处的检测值记为
F(530)0。
H. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可)，645 nm 处的检测值记为
F(645)0。
3) 根据测量数据计算死细胞与活细胞的比例：
% Live Cells=
F(530)sam−F(530)min
F(530)max−F(530)min
×100%
% Dead Cells=
F(645)sam−F(645)min
F(645)max−F(645)min
×100%
使用 70%甲醇致死处理 293T 细胞，用 2μM Calcein AM 和 4μM EthD-1 的染色工作液对细胞染色 20 min 后进行荧光显微镜观察，结果如图 2 所示。
pcDNA3.1/pre-miR-204 pre-miR-204 Amp
pcDNA3.1/pre-miR-143 pre-miR-143 Amp
pcDNA3.1-LNC-REG3G-3 LNC-REG3G Amp
pcDNA3.1-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 Amp
pcDNA3.1-FGD5-AS1 FGD5-AS1 Amp
pcDNA3.1-KCNQ101T1 KCNQ101T1 Amp
pcDNA3.1-h-RSF1 h-RSF1 Amp
pcDNA3.1-h-LOXL2 h-LOXL2 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21-AS1 h-SOX21-AS1 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21 h-SOX21 Amp
pcDNA3.1-h-LINC00958 h-LINC00958 Amp
pcDNA3.1-LINC01811 LINC01811 Amp
pcDNA3.1-LOC101928219 LOC10928219 Amp
pcDNA3.1-Lnc-BCYRN1 Inc-BCYRN1 Amp
pcDNA3.1-lncRNA-ISR22 lncRNA-ISR22 Amp
pcDNA3.1-circ-001862 circ-001862 Amp
pcDNA3.1-circ0058514 circ0058514 Amp
pcDNA3.1-circ-sirt1 circ-sirt1 Amp
pSilencer-siSTX18-AS1 STX18-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-AFAP1-AS1 AFAP1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC-REG3G LNC-REG3G shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC00507 LNC00507 shRNA Amp
pSilencer-shR-RNASEH1-AS1 RNASEH1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-SPACA6P-AS SPACA6P-AS shRNA Amp
pSilencer-shR-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC00115 LINC00115 shRNA Amp
pSilencer-shR-INCRNAISR22 INCRNAISR22 shRNA Amp
pSilencer-shR-Lnc-DLK1 Lnc-DLK1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC01811 LINC01811 shRNA Amp
pSilencer-shR-LOC10928219 LOC10928219 shRNA Amp
pSilencer-shR-ADAMTS9-AS1 ADAMTS9-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-circ0001862 circ0001862 shRNA Amp
pSilencer-shR-circ0058514 circ0058514 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-5193 miR-5193 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-4635 miR-4635 shRNA Amp
pcDNA3.1-ADAMDEC1 ADAMDEC1 Amp
pcDNA3.1-ASIC2 ASIC2 Amp
pcDNA3.1-Myc-B27(C-tag) B27 Amp
pcDNA3.1-BLK BLK Amp
pcDNA3.1-Braf Braf Amp
pcDNA3.1-HA-CD58 CD58 Amp
pcDNA3.1-CLIC4 CLIC4 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD134 CD134 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD274 CD274 Amp
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文献和实验1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低;而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起
（pH6.8） 1.5 mol/L Tris•HCl（pH8.8） 10% SDS 10% 过硫酸胺（APS） 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶（分离胶）浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 Q：配胶缓冲液系统对电泳的影响? A：在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低;而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩
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