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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
PRKY Protein
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
20 µg
蛋白名称:PRKY Protein
蛋白构建:Recombinant human PRKY (40-end) was expressed by baculovirus in Sf9 insect cells using an N-terminal GST tag.
表达宿主:Baculovirus-Insect Cells
蛋白分子量:~53 kDa
蛋白NP号:BC074852
蛋白氨基酸序列:40-end
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文献和实验QIAgene Expression Kit——再也不为重组蛋白的表达效率发愁 据Protein Database的最新数据表明,目前已知的人类蛋白有35,000种(包括splice variants),大约33%的蛋白正处于研究中,但是只有8%的蛋白能够成功表达。统计数据同时显示,目前克隆,表达,纯化的成功率只维持在54%,74%,59%。所以说,在蛋白表达的漫漫征途中,拿不到想要的蛋白是一件非常普遍的事情。举一个例子来说对于目标蛋白不表达或表达量低这个常见问题,需要排除或检查的因素就太多
蛋白表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明,利用蛋白表达系统表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。常见的蛋白表达系统包括大肠杆菌/原核蛋白表达系统、酵母/真核蛋白表达系统、哺乳动物细胞蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统、植物蛋白表达系统。 在此针对一些常见的问题进行总结,与大家共享,共同学习。 Q1:为什么蛋白表达出来了,SDS-PAGE检测时大小不符? A1:进行SDS-PAGE检测的时候蛋白的净电荷会影响迁移率。带电量高的蛋白会
就在于包含体中带有6 × His标签的蛋白可以在变性剂作用下生成可溶性蛋白,然后用Ni-NTA纯化。如有必要,变性条件下纯化的蛋白可以复性,重新折叠。 尽管如此,很多研究者还是发现纯化过程中的复性比较困难。另一个方法是调整表达环境使生成少量的可溶的天然构象的重组蛋白。即使形成了包含体,一些带6×His标签的蛋白仍可以在胞质中,这些胞质中的可溶性蛋白可以在天然的非变性的条件下被纯化。如果需要更多的可溶性蛋白,诱导后降低培养温度会有所帮助。培养温度常常直接影响蛋白表达水平和可溶性,降低温度可以降低表达
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