- ￥3380
- Sino Biological
- 北京
- R02-12LG
- 2026年01月26日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
RET (L790F), Active
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
10 µg
蛋白名称：RET (L790F), Active
蛋白构建：Recombinant human RET (L790F) (658-end) was expressed by baculovirus in Sf9 insect cells using an N-terminal GST tag.
表达宿主：Baculovirus-Insect Cells
蛋白分子量：~74 kDa
蛋白NP号：NM_020630
蛋白氨基酸序列：658-end (L790F)
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文献和实验X-100或脱氧胆酸钠）和低浓度变性剂（2mol/L尿素或盐酸胍等）洗涤除去脂类和膜蛋白，这一步很重要，否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解[6、7、8]。 包涵体的溶解必须用很强的变性剂，如8mol/L尿素、6~8mol/L盐酸胍，通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。其中尿素的增溶效果稍差，异氰盐酸胍最强；去污剂，如SDS[7]，可以破坏蛋白内的疏水键，可以增溶几乎所有的蛋白，但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中；酸，如70%甲酸[9]，可以破坏蛋白
杆菌的包涵体可采用离心收获。 洗涤 包涵体常用的洗涤试剂为中性去垢剂和还原剂。包涵体中主要由重组蛋白组成，同时也含有一些外膜蛋白（Omp C、Omp F、Omp A）、16S 和 23S、5S的r RNA、质粒 DNA 和其它杂质。去除这些杂质，可采用去垢剂 Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂等对包涵体充分洗涤。包涵体洗涤的洁净程度，对于后续的纯化步骤十分重要，包涵体纯度高，可以大大降低后续的纯化压力。但是，变性剂尿素的使用应该注意的是大肠杆菌外膜蛋白Omp T（37 kD
Ultrasonic， Danbury， CT)。 ( 9 ) NiNTA-琼脂糖（NTA：nickel- nitrilotri-acetic acid，镍-三乙酸基氨，Qiagen)。 ( 10 ) 1 ml 聚丙烯柱（Qiagen， Hilden，Germany) 。 ( 11 ) Bradford 试剂（Bio- Rad， Munich， Germany) 。 2.2 蛋白质芯片上的激酶检测 ( 1 ) TBS + Tween ( TBST )：10 mmol/L Tris
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