- ￥2380
- Sino Biological
- 北京
- S39-30EG
- 2025年10月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
SIRT5 Protein
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
20 µg
蛋白名称：SIRT5 Protein
蛋白构建：Recombinant full length human SIRT5 was expressed in E. coli cells using an N-terminal GST tag.
表达宿主：E. coli
蛋白分子量：~60 kDa
蛋白NP号：NM_012241
蛋白氨基酸序列：Full Length
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文献和实验一. 实验目的1. 掌握重组蛋白诱导表达的方法。2. 亲和层析法纯化His 标记的融合蛋白。二. 实验原理将目的基因连接在表达载体后，通过加入诱导剂IPTG诱导目的基因表达。表达载体除具有蛋白表达所需要的启动子外，在终止子前有6个His编码序列，便于蛋白的亲和层析纯化。亲和层析以蛋白质或生物大分子和结合在介质上的配基间的特异亲和力为基础。本实验采用磁座和结合有Ni2+的磁珠在变性或非变性条件下对融合蛋白进行分离纯化，只需通过“结合-清洗-洗脱”三个简单的操作步骤就可完成。该系统可根据样本量灵活
学功能活性，还有利于维持细胞因子的稳定性，延长其半衰期。 图4 不同宿主表达IL-4在细胞培养基中的稳定性比较(37C, 5 days) 例如白介素4，如上图所示：人源细胞表达生产的IL-4由于具有正确完整糖基化修饰，SDS-PAGE的表观分子量为20 kDa左右，而E.Coli来源的IL-4缺乏糖基化，因而分子量仅为14 kDa。由于具有正确的糖基化，因此，将等量两种不同宿主来源的细胞因子加入到细胞培养基中在37度下培养5天后，细菌来源的白介素4活性显著降低
对35,000个人类基因所设计），专门用于解决E.coli中重组蛋白表达的瓶颈问题。 文章一开始就提到，在E.coli中表达真核蛋白的成功率很低，限制因素之一就是细菌和哺乳细胞的密码子使用频率不同；限制因素之二mRNA的二级结构导致翻译的低效率和蛋白的低产量；限制因素之三是信号肽的存在。而使用QIAgene E.coli预制表达载体则综合考虑了密码子使用频率的问题，同时消除了容易引起mRNA的二级结构的重复序列和其他因素。针对限制因素之三的信号肽因素，我们都知道在真核细胞中，糖基化蛋白和分泌
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