植物山梨醇脱氢酶（SDH）活性ELISA检测试剂盒

植物叶绿体的分离制备

mol/L 山梨醇， 50 mmol/L Tris-HCl （或 Tricine ） pH7.6 ， 5 mmol/L MgCl 2 , 10 mmol/L NaCl ， 2 mmol/L EDTA ， 2 mmol/L 异抗坏血酸钠。配法：称 60 g 山梨醇、 6.06 g Tris 、 1 g MgCl 2 ? 6H 2 O 、 0.6 g NaCl 、 0.77 g EDTA-Na 2 、 0.4 g 异抗坏血酸钠，溶解后用 1 mol/L HCl 调 pH 至 7.6 ，定容至 1000

离体叶绿体的制备以及完整度的测定

后就可能完全丧失。叶绿体是绿色植物细胞中典型的细胞器，可通过研磨叶片并匀浆后，根据其颗粒大小经过滤、差速离心加以分离。分离叶绿体应在等渗溶液中制备，以减少渗透压对叶绿体的伤害。整个分离过程应在0~4℃下进行，所有提取物、溶液和材料，也应保存在该温度下备用。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降，因此，分离工作应尽可能在短时间内完成。 实验试剂   1. 提取液：含0.33mol/L山梨醇，0.05 mol/L MES (pH 6.1)，0.01 mol/L

别小瞧了ELISA

管显色适当时，即可终止酶反应。（三）洗涤洗涤在ELISA过程中不是反应聚，但却是决定实验成败的关键。洗涤的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯待塑料对蛋白质的吸附作用是普遍性的。因此在ELISA测定的反应过程中应尽量避免非特异性吸附，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。在标本和结合物的稀释液和洗涤液中加入聚山梨酯（吐温，Tween）一类物质即右达到此目的。聚山梨酯是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯，为非离子型的表面