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- 上海莼试
- CS-01Y76181
- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
22
- 英文名：
Befiradol hydrochloride
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
10mM*1 mL in DMSO 5mg 10mg 25mg 50mg 100mg
| 产品名称 | Befiradol hydrochloride | 产品货号 | CS-01Y76181 |
| 规格 | 10mM*1 mL in DMSO 5mg 10mg 25mg 50mg 100mg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >99.50% | 分子式 | C20H23Cl2F2N3O |
| 分子量 | 430.32 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Befiradol hydrochloride规格：10mM*1 mL in DMSO 5mg 10mg 25mg 50mg 100mg
CAS：N/A
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C20H23Cl2F2N3O
分子量：430.32
溶解度：DMSO: 125 mg/mL (290.48 mM)
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Befiradol hydrochloride (NLX-112 hydrochloride) is a selective 5-HT1A receptor agonist.Befiradol (F13640; NLX-112) reduces the activity of dorsal raphe serotonergic neurons at 0.2-18.2 μg/kg, i.v. (cumulative doses; ED50=0.69 μg/kg, i.v.) and increases the discharge rate of 80% of mPFC pyramidal neurons in the same dose range (ED50=0.62 μg/kg, i.v.). Both effects are reversed by the suquent administration of the 5-HT1A receptor antagonist (±)WAY100635. In microdialysis studies, Befiradol (F13640; NLX-112) (0.04-0.63 mg/kg, i.p.) dose-dependently decreases extracellular 5-HT in the hippocampus and mPFC. Likewise, Befiradol (F13640; NLX-112) (0.01-2.5 mg/kg, i.p.) dose-dependently increases extracellular DA in mPFC, an effect dependent on the activation of postsynaptic 5-HT1A receptors in mPFC. Local perfusion of Befiradol in mPFC (1-1,000 μM) also increases extracellular DA in a concentration-dependent manner. Both the systemic and local effects of Befiradol are prevented by prior (±)WAY100635 administration[1].[1]. Lladó-Pelfort L, et al. In vivo electrophysiological and neurochemical effects of the selective 5-HT1A receptor agonist, F13640, at pre- and postsynaptic 5-HT1A receptors in the rat. Psychopharmacology (Berl). 2012 May;221(2):261-72.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Z-D-Asp-OH | H 89 |
| Cobimetinib hemifumarate | 微管多特异性有机阴离子转运蛋白1(ABCC2)检测试剂盒 |
| BIX 02188 | 网膜素(omentin)检测试剂盒 |
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| CHPG | 微管微丝交联因子1(MACF1)检测试剂盒 |
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| SB 706504 | 微管相关蛋白1A/1B轻链3B(MAP1LC3B)检测试剂盒 |
| Boc-LRR-AMC | Befiradol hydrochloride微管相关蛋白2(MAP-2)检测试剂盒 |
| TPI-1 | 微管相关蛋白tau(MAPT)抗检测试剂盒 |
| 维生素B1(VB1)检测试剂盒 | 微量转铁蛋白(MTF)检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验Guanidine Hydrochloride Purification of Proteins From SDS
Pepstatin A (2.0 mg/ml)10 ml Leupeptin (1.0 mg/ml)10 ml Aprotinin (5.0 mg/ml)(Protease Inhibitor Cocktail Sigma #P8340)Denaturation Buffer6 M guanidine hydrochloride 57.3 g G-HCl20 mM Hepes 7.9 2 ml 1M Hepes pH 7.910 mM KCl 0.074 g KCl0.5 mM DTT 100 ml 0.5 M
Guanidine Hydrochloride Purification of Proteins From SDS PAGE
(Sigma #P7626) 10 ml Pepstatin A (2.0 mg/ml) 10 ml Leupeptin (1.0 mg/ml) 10 ml Aprotinin (5.0 mg/ml) (Protease Inhibitor Cocktail Sigma #P8340) Denaturation Buffer 6 M guanidine hydrochloride 57.3 g G-HCl 20 mM Hepes 7.9 2 ml 1M Hepes pH 7.9 10 mM
Packed column subcritical and/or supercritical fluid chromatography (p-sub or pSFC) has been used as a powerful chiral separation technique, whereby a mobile phase produces low viscosity, a high diffusion coefficient, and a solvating power. P
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