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- 上海莼试
- CS-01Y76908
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
38
- 英文名：
Octyl-α-hydroxyglutarate
- CAS号：
2097068-39-6
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
1mg 5mg 10mg
规格：1mg 5mg 10mg
CAS：2097068-39-6
别名：N/A
化学名：N/A
Octyl-α-hydroxyglutarate分子式：C13H24O5
分子量：260.3
溶解度：DMF: 10 mg/ml,DMSO: 10 mg/ml,Ethanol: 20 mg/ml,PBS (pH 7.2): 5 mg/ml
储存条件：Store at -20°C
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本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
| 产品名称 | Octyl-α-hydroxyglutarate | 产品货号 | CS-01Y76908 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg | CAS号 | 2097068-39-6 |
| 含量 | >95.00% | 分子式 | C13H24O5 |
| 分子量 | 260.3 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
α-Hydroxyglutaric acid is normally metabolized to 2-oxoglutarate by D- and L-2-hydroxyglutarate dehydrogenases. Mutations in these enzymes cause 2-hydroxyglutaric aciduria, a neurometabolic disorder. Recent studies have found that mutations in isocitrate dehydrogenase 1 (IDH1) and IDH2, typically associated with certain cancers, can cause these enzymes to convert isocitrate to 2-HG, rather than α-ketoglutarate. 2-HG is structurally similar to α-ketoglutarate and competitively inhibits α-ketoglutarate-dependent dioxygenases, including lysine demethylases and DNA hydroxylases. Octyl-α-hydroxyglutarate is a cell-permeable derivative of 2-HG.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| MST-312 | Amyloid β-Protein (1-38) |
| Amyloid β-Protein (36-38) | 凋亡相关因子(FAS/CD95)检测试剂盒 |
| Anti-Inflammatory Peptide 2 | 红细胞生成素(EPO) 试剂盒 ELISA |
| Glpbio espresso mugs, pack of 6 assorted colors | 嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit |
| Biotinyl-(Glu¹)-Orexin A (human, mouse, rat) | 红细胞生成素受(EPOR)ELISA检测试剂盒 |
| Biotinyl-Neuropeptide Y (human, rat) | 嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)检测试剂盒 |
| Biotinyl-εAhx-OH | 内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)试剂盒 ELISA |
| Boc-Aib-OSu | Mouse Thyroid-Peroxidase, TPO Elisa Kit |
| Boc-Arg(Pmc)-OH | 凋亡相关因子配(FASL) ELISA Kit |
| Boc-Cys(Acm)-OSu | 酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA检测试剂盒 |
| Boc-D-Arg(Pmc)-OH | 碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)试剂盒 ELISA |
| Boc-D-Glu(OFm)-OH | 碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)检测试剂盒 |
| Boc-D-Orn(Fmoc)-OH | Octyl-α-hydroxyglutarate碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA Kit |
| Pantothenate Kinase Inhibitor | FMS样酪氨酸激酶3配(Flt3L)ELISA检测试剂盒 |
| 粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit | FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)试剂盒 ELISA |
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文献和实验和C18短。 MOS C8，Octyl -C8H17 ∨ ∨ 中等极性到强极性化合物，小肽和蛋白质，极性药物，甾族化合物和环境样品。 ODS C18 -C18H
；HPLC 级）。 ( 5 ) n-Octyl-glycopyranoside (n-OGP)。 ( 6 ) 测序级猪胰蛋白酶。虽然也可用其他优质的测序级猪胰蛋白酶，但为了均一性和方便，使用 Promega 公司的测序级猪胰蛋白可以优化实验方案和数据。 ( 7 ) 碳酸氢铵缓冲液：25 mmol/L 碳酸氢铵缓冲液，pH 7.8。 ( 8 ) 乙腈/碳酸氢铵缓冲液：50/50 (V/V) 乙腈/25 mmol/L 碳酸氢铵缓冲液( pH 7.8)。 ( 9 ) 消化缓冲
的变化提供了准确、可靠、快速的测定方法。但研究CD4+淋巴细胞细胞因子谱变化时需要将T淋巴细胞特异克隆。最近发现，在外周血白细胞中，除CD4淋巴细胞外，CD8细胞也存在Th1和Th2样细胞因子谱的变化［21］，甚至酸性粒细胞也具有产生多种细胞因子的能力［22］，如酸性粒细胞可分泌IL-4、IL-5、IL-1α、IL-6、IL-8、TNFα、TGF等。因此单纯通过细胞因子谱的变化难以有效识别Th1和Th2细胞。应用多标记技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及mRNA表达可以识别Th1和Th
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